飼養(yǎng)層細胞的特點是什么
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飼養(yǎng)層細胞的特點是什么
飼養(yǎng)層細胞通常是成纖維類細胞,這些細胞可以提供實驗細胞更好的營養(yǎng),有的分化研究則是必須有飼養(yǎng)層細胞。下面是學習啦小編精心為你整理的飼養(yǎng)層細胞的特點,一起來看看。
飼養(yǎng)層細胞的特點
在正常機體內,細胞除了獲得一些血液來的營養(yǎng)外,還在細胞與細胞之間互換特殊的物質,用于分裂分化和營養(yǎng)等。因而,在細胞體外培養(yǎng)中,除了正常的培養(yǎng)基外,先培養(yǎng)一層特殊的細胞,然后再在其上接種要實驗的細胞,這樣更能模擬體內環(huán)境。這些特殊的細胞就是飼養(yǎng)層細胞,通常是成纖維類細胞,這些細胞可以提供實驗細胞更好的營養(yǎng),有的分化研究則是必須有飼養(yǎng)層細胞。
胚胎干細胞及其培養(yǎng)用飼養(yǎng)層細胞的制備方法
所述新型的小鼠胚胎干細胞及其培養(yǎng)用飼養(yǎng)層細胞的制備方法,飼養(yǎng)層細胞采用化學固定的方式制備。所述化學固定采用多聚甲醛(PA)作為固定劑?;蛘?,所述化學固定采用戊二醛(GA)作為固定劑。整體培養(yǎng)過程包括如下步驟:
(1)準備注射前將胚胎干細胞接種到飼養(yǎng)層細胞上,貼合度滿足后進行一次傳代;
(2)注射前1天或注射當天將細胞用酶進行消化,然后離心收集細胞,吸出上清液后加培養(yǎng)基重懸;
(3)冷藏或直接注射。
進一步地,步驟中貼合度為80%。相比于生物培養(yǎng)法,化學固定法能夠提供質量穩(wěn)定的ES細胞,可反復使用,而且飼養(yǎng)層細胞在消化處理時不會隨著ES細胞脫落。
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