飼養(yǎng)層和滋養(yǎng)層細(xì)胞的區(qū)別是什么
飼養(yǎng)層和滋養(yǎng)層細(xì)胞的區(qū)別是什么
飼養(yǎng)層和滋養(yǎng)層細(xì)胞有著很大的區(qū)別,那么飼養(yǎng)層和滋養(yǎng)層細(xì)胞的區(qū)別是什么呢?下面是學(xué)習(xí)啦小編精心為你整理的飼養(yǎng)層和滋養(yǎng)層細(xì)胞的區(qū)別,一起來看看。
飼養(yǎng)層和滋養(yǎng)層細(xì)胞的區(qū)別
滋養(yǎng)層細(xì)胞
在胚胎發(fā)育成桑椹胚后,桑椹胚進(jìn)一步發(fā)育,細(xì)胞開始出現(xiàn)分化。聚集在胚胎的一端,個體較大的細(xì)胞,稱為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(inner cell mass,ICM),將來發(fā)育成胎兒的各種組織,而沿透明帶內(nèi)壁擴(kuò)展和排列的,個體較小的細(xì)胞,稱為滋養(yǎng)層細(xì)胞,它們將來發(fā)育成胎膜和胎盤。
滋養(yǎng)層為哺乳類早期胚泡壁的單層細(xì)胞所形成的薄膜。是因為以后從母體攝取胎兒營養(yǎng)起重要作用而有此名。滋養(yǎng)層 trophoblast 為哺乳類早期胚泡壁的單層細(xì)胞所形成的薄膜。是因為以后從母體攝取胎兒營養(yǎng)起重要作用而有此名。哺乳動物圍繞胚泡形成的胚外層上皮。將來形成絨毛的外層,和母體組織共同組成胎盤。
基因診斷時,通常取少量滋養(yǎng)層細(xì)胞診斷是否患有遺傳病,這樣不會影響胎兒發(fā)育。
飼養(yǎng)層細(xì)胞
所謂飼養(yǎng)層細(xì)胞就是指一些特定細(xì)胞(如顆粒細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、輸卵管上皮細(xì)胞等已在體外培養(yǎng)的細(xì)胞),經(jīng)有絲分裂阻斷劑(常用絲裂霉素)處理后所得的細(xì)胞單層。是細(xì)胞培養(yǎng),尤其是胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)常用的生長增值促進(jìn)劑和分化抑制劑。
比較常用的飼養(yǎng)層細(xì)胞就是胚胎成纖維細(xì)胞,即教材上所說的。成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損以及骨創(chuàng)傷的修復(fù)有著十分重要的作用。
成纖維細(xì)胞胞體較大,胞質(zhì)弱嗜堿性,胞核較大呈橢圓形,染色質(zhì)疏松著色淺,核仁明顯。電鏡下,其胞質(zhì)可見豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、游離核糖體和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體,表明它具有合成和分泌蛋白質(zhì)的功能。成纖維細(xì)胞尚可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維及有機(jī)基質(zhì)。成纖維細(xì)胞胞體較大,胞質(zhì)弱嗜堿性,胞核較大呈橢圓形,染色質(zhì)疏松著色淺,核仁明顯。電鏡下,其胞質(zhì)可見豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、游離核糖體和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體,表明它具有合成和分泌蛋白質(zhì)的功能。成纖維細(xì)胞尚可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維及有機(jī)基質(zhì)。
各種創(chuàng)傷均會造成不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損,必須通過細(xì)胞增生和細(xì)胞間基質(zhì)的形成來進(jìn)行組織修復(fù)。在此修復(fù)過程中,成纖維細(xì)胞起著十分重要的作用。
飼養(yǎng)層細(xì)胞和滋養(yǎng)層細(xì)胞的差別
在正常機(jī)體內(nèi),細(xì)胞除了獲得一些血液來的營養(yǎng)外,還在細(xì)胞與細(xì)胞之間互換特殊的物質(zhì),用于分裂分化和營養(yǎng)等。因而,在細(xì)胞體外培養(yǎng)中,除了正常的培養(yǎng)基外,先培養(yǎng)一層特殊的細(xì)胞,然后再在其上接種要實驗的細(xì)胞,這樣更能模擬體內(nèi)環(huán)境。這些特殊的細(xì)胞就是飼養(yǎng)層細(xì)胞,通常是成纖維類細(xì)胞,這些細(xì)胞可以提供實驗細(xì)胞更好的營養(yǎng),有的分化研究則是必須有飼養(yǎng)層細(xì)胞。
飼養(yǎng)層細(xì)胞的影響因素
飼養(yǎng)層的影響,主要體現(xiàn)在飼養(yǎng)層種類、絲裂霉素處理飼養(yǎng)層的時間、飼養(yǎng)層細(xì)胞的代數(shù)和飼養(yǎng)層細(xì)胞的密度等。動物種類不同對飼養(yǎng)層種類的要求也不同。
飼養(yǎng)層種類
STO PMEF: 對各種動物都較適宜,,但最可靠的方法還是根據(jù)動物種類篩選最佳飼養(yǎng)層為宜。有研究表明,PMEF比STO更適合用于小鼠ES(胚胎干細(xì)胞)的培養(yǎng)。
UE(子宮上皮細(xì)胞)
BRL(大鼠肝細(xì)胞)等
動物種類
需要經(jīng)過篩選來確定最適宜該種動物ES分離克隆的飼養(yǎng)層
絲裂霉素處理滋養(yǎng)層的時間
目前絲裂霉素(常用有絲分裂阻斷劑)處理時間在小鼠成纖維細(xì)胞上一般要求為:在37攝氏度,5%二氧化碳飽和溫度的條件下處理24h,時間過短達(dá)不到預(yù)定目的,成纖維細(xì)胞不能被成功地抑制住,時間過長則使細(xì)胞老化,活性下降,分泌因子的能力降低,從而直接影響ES細(xì)胞增殖和分化的抑制。同時處理完的清洗工作也很重要,一般要求用無鈣鎂PBS沖洗4~5遍,以確保絲裂霉素的徹底清除。
飼養(yǎng)層細(xì)胞的代數(shù)及密度
以小鼠成纖維細(xì)胞為例,選3~5代,密度為10^6-10^7個/ml為宜,代數(shù)過低所含雜細(xì)胞太多,代數(shù)過高則細(xì)胞活力降低。
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