花青素的功效與作用(2)
提取花青素的方法
溶劑提取法
溶劑提取是花青素的常規(guī)提取方法, 溶劑多選擇甲醇、乙醇、丙酮、水或者混合溶劑等。為了防止提取過程中非?；幕ㄇ嗨亟到? 常在提取溶劑中加入一定濃度的鹽酸或者甲酸, 但在蒸發(fā)濃縮時這些酸又會導致酰基化的花青素部分或全部的水解。另外, 對于提取物中可能含有脂溶性成分的樣品, 需采用有機溶劑如正己烷、石油醚、乙醚等進行萃取 。傳統(tǒng)的溶劑提取方法提取時間長, 生產(chǎn)效率較低, 且熱溶劑容易造成花青素降解以及生理活性的降低。
國外提取花青素的傳統(tǒng)方法是采用低溫( 4~8 ℃) 或者常溫( 25℃ ) 避光條件下1% HCl 甲醇溶液浸提16~ 20 h, 或者采用01 5%、1% 的三氟乙酸的甲醇溶液, 4 ℃條件下浸提24h ?？紤]到食品中殘留甲醇的毒性, 也有用1% 的HCl 乙醇溶液代替甲醇溶液 。另外為了避免?；幕ㄇ嗨氐乃? 也可選擇弱酸如酒石酸、檸檬酸代替鹽酸。而國內(nèi)則多采用熱溶劑( 50~ 70℃ ) 浸提1~ 2 h 的方式 , 溶劑可選擇不同濃度的醇溶液或酸化的水溶液。
加壓溶劑萃取法
加壓溶劑萃取, 又稱加壓液體萃取( pressurizedliquid ex tractio n, PLE ) 、快速溶劑萃取( acceleratedsolv ent ex tr act io n, A SE) , 它是通過外來壓力提高溶劑的沸點, 進而增加物質(zhì)在溶劑中的溶解度以及萃取效率的。
目前PSE 技術(shù)對于食品中功能成分的提取主要集中在類黃酮、酚類物質(zhì)以及其他抗氧化活性成分的研究上。該技術(shù)在花青素的提取方面也有報道。采用此技術(shù)優(yōu)化紫甘藍中花青素的最佳提取工藝, 最佳參數(shù)為: 樣品21 5 g, 溫度99 ℃ , 提取時間7 min, 溶劑為V( 水) BV( 乙醇) BV( 甲醇) = 94:5 : 1。
水溶液提取法
有機溶劑萃取的花青素多有毒性殘留且生產(chǎn)過程環(huán)境污染大, 有鑒于此, 水溶液提取應運而生。該方法一般將植物材料在常壓或高壓下用熱水浸泡,然后用非極性大孔樹脂吸附; 或直接使用脫氧熱水提取, 再采用超濾或反滲透, 濃縮得到粗提物。
微生物發(fā)酵提取法
此方法將生物發(fā)酵技術(shù)應用于花青素的提取之中, 是生物科學與化工生產(chǎn)之間的超強滲透與有效結(jié)合。微生物發(fā)酵法利用微生物或酶讓含有花青素的細胞胞壁降解分離, 使細胞胞體內(nèi)花青素充分溶入到提取液中, 從而增加提取的產(chǎn)率與速率。
其他提取方法
包括高壓脈沖電場輔助提取、雙水相萃取、超高壓輔助提取。前兩種可應用于蛋白質(zhì)、核酸、多糖的提取研究, 而超高壓輔助提取已成功用于葡萄中花青素的提取之中, 且對比發(fā)現(xiàn)高壓輔助提取花青素等多酚類的效率可以提高近50% 。
花青素鑒定方法
花青素總量測定多采用分光光度法，樣品經(jīng)沸水提取，加酸性乙醇顯色，生成特有的剛果紅，于波長納米處測吸光度，該法不受黃酮苷及兒茶素的干擾，但受原花色素、花白素干擾，分析結(jié)果往往偏高，靈敏度也不夠理想，但是茶葉中花青素總量分析沿用此法; 除此，還可以采用高效液體相色譜法對花青素單一成分結(jié)構(gòu)的鑒定，可以用HPLC 對貴州黑糯米稻米表皮中提取的三種花青素結(jié)構(gòu)進行鑒定，用UV-VIS、IR、H-NMR 和HPLC 等方法，對藍靛果中分離出來的純花青素( 矢車菊素) 的結(jié)構(gòu)進行鑒定。
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