微生物檢驗(yàn)技術(shù)論文(2)
微生物檢驗(yàn)技術(shù)論文
微生物檢驗(yàn)技術(shù)論文篇二
淺談空氣微生物的檢驗(yàn)技術(shù)
摘要：目的： 探討空氣微生物的檢驗(yàn)措施。方法： 通過(guò)實(shí)驗(yàn)室的科學(xué)檢驗(yàn)，掌握空氣微生物的屬性與致病因素，總結(jié)出系統(tǒng)的檢驗(yàn)措施和相應(yīng)的控制方法。結(jié)論： 科學(xué)準(zhǔn)確的掌握空氣微生物的檢驗(yàn)措施，把握致病規(guī)律，才能為有效的控制和預(yù)防相關(guān)疾病提供可靠的依據(jù)。
關(guān)鍵詞：空氣微生物;檢驗(yàn);細(xì)菌
【中圖分類號(hào)】R446.5 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1672-8602(2014)01-0188-01
存在于空氣中的微生物。是主要的空中浮游生物。對(duì)較干燥環(huán)境和對(duì)紫外線具有抗性的種類，主要有附著于塵埃上的從地面飛起的球菌屬(包括八疊球菌屬在內(nèi)的好氧菌);形成孢子的好氧性桿菌(如枯草芽孢桿菌);色串孢屬等野生酵母;青霉等霉菌的孢子等。下面將空氣微生物的檢驗(yàn)技術(shù)分析匯報(bào)如下。
1各類微生物的基本檢驗(yàn)程序
空氣中微生物檢驗(yàn)主要分為細(xì)菌、病毒、真菌、立克次體類的檢驗(yàn)。
2幾種常見(jiàn)空氣微生物采樣
方法及細(xì)菌菌落總數(shù)測(cè)定
2.1Andersen采樣器
2.1.1構(gòu)造： 新型采樣器是Andersenl958年研制而成由采樣膠體、流量劑、壓力計(jì)和抽氣泵組成。
2.1.2特點(diǎn)： ①采集空氣微粒范圍寬;
?、诓蓸有矢?
③生物失活率低;
?、苊舾行愿?
⑤操作簡(jiǎn)便;
?、迲?yīng)用范圍廣，常用于空氣致病微生物的采集。
2.1.3操作步驟：①消毒
采樣器的消毒方法有3種：75%酒精;高壓蒸氣滅菌：用于采樣頭的消毒;環(huán)氧乙烷消毒。
?、谟嘘P(guān)參數(shù)設(shè)定：
流量，28.3L/min，固定流量抽吸空氣，流量準(zhǔn)確與否是該采樣器操作的關(guān)鍵所在，流量不準(zhǔn)或未經(jīng)校正的采樣器不可使用。真空度，0.1354kPa。若真空度不夠，可影響氣流速度，從而影響采樣效率。
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采樣用培養(yǎng)基平皿要提前一天準(zhǔn)備好，每個(gè)樣品需6個(gè)平皿，預(yù)置37℃18～24h培養(yǎng)，無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)，即可用于采樣。
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根據(jù)采樣目的而定，一般置于人的呼吸帶高度，大約1.0～1.5m左右，并且采樣人員應(yīng)遠(yuǎn)離采樣頭。采集時(shí)間要根據(jù)現(xiàn)場(chǎng)微生物污染程度而定。
⑤培養(yǎng)
打開(kāi)采樣器，蓋上平皿蓋。細(xì)菌培養(yǎng)37℃培養(yǎng)48h，真菌培養(yǎng)28℃培養(yǎng)72h。
?、蘧溆?jì)數(shù)：計(jì)數(shù)方法可以采用分段計(jì)數(shù)及菌落計(jì)數(shù)器進(jìn)行。一般以菌落形成單位表示。一般每個(gè)平皿最多不超過(guò)250cfu。
2.2THK-201型采樣器
2.2.1構(gòu)造： THK-201型采樣器是在JWL型采樣器基礎(chǔ)上改進(jìn)而成?；緲?gòu)成包括：采樣頭、流量計(jì)、抽氣泵、可調(diào)電路。
2.2.2特性： ①采樣頭的篩孔(隙)為可調(diào)式;
?、诓东@率高;
?、圻m應(yīng)范圍廣，在不同環(huán)境通過(guò)調(diào)節(jié)篩孔來(lái)采集不同大小的微粒提高了其應(yīng)用范圍，可采集細(xì)菌、真菌、病毒、立克次體、原生動(dòng)物、植物、花粉、藻類等，適用于環(huán)保、生物工程、醫(yī)療衛(wèi)生、衛(wèi)生防疫、工農(nóng)牧業(yè)、食品加工業(yè)等;
④功能齊全。
2.2.3操作步驟： ①平板制備
制作平皿培養(yǎng)基應(yīng)注意厚薄均勻，保證無(wú)菌。瓊脂濃度要較其他采樣方法略高一點(diǎn)(≤2.4%)，過(guò)高過(guò)低均會(huì)影響采樣效率。
②儀器相關(guān)參數(shù)
電源，工作電壓：220V;轉(zhuǎn)速，選檔，定時(shí)范圍;流量，5～35L/min;采樣篩頭，最小狹縫≤20μm，最大500μm。根據(jù)需要分級(jí)調(diào)節(jié)，使用時(shí)要對(duì)環(huán)境中微生物有一個(gè)大略估計(jì)，以便進(jìn)行篩孔調(diào)節(jié)。
?、叟囵B(yǎng)
方法和時(shí)間同Andersen采樣器。
2.3自然沉降采樣法
2.3.1特點(diǎn)：①簡(jiǎn)便易操作，不需特殊采樣器，只需采樣的平皿培養(yǎng)基。
②能反映沉降細(xì)菌的數(shù)量，特別是醫(yī)院的燒傷外科、手術(shù)室、人流室等一些相對(duì)空氣流動(dòng)性不大，但空氣中微生物在靜止時(shí)下落到物表，造成污染，更嚴(yán)重的造成院內(nèi)感染。
③可用于粗略反映空氣中細(xì)菌污染狀況。
④此法不足之處：用下落菌推算空氣中懸浮菌量，有推理上的錯(cuò)誤。比較公認(rèn)的是奧梅梁斯基的公式來(lái)推算濃度，他認(rèn)為在100cm2培養(yǎng)基表面，5min內(nèi)能落下約10L空氣中所含菌量。標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌種類較少。采樣條件要保證無(wú)菌狀態(tài)，十分難以控制[1]。
2.3.2自然沉降法采樣的操作步驟：①培養(yǎng)基的制備：
一般采用9cm直徑平皿制作。細(xì)菌用普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂，真菌用沙堡培養(yǎng)基或察氏培養(yǎng)基。制備好的平板應(yīng)置35～37℃預(yù)培養(yǎng)18～24h，選無(wú)菌生長(zhǎng)的平皿用于采樣。
②選擇檢測(cè)點(diǎn)：
室內(nèi)面積≤30m2沿一對(duì)角線上取三點(diǎn)，即中間一點(diǎn)兩端各距墻1m處各取一點(diǎn)，室內(nèi)面積>30m2，設(shè)東、南、西、北、中5個(gè)點(diǎn)，各點(diǎn)均距墻1m，采樣高度0.8～1.5m。若使用采樣器監(jiān)測(cè)時(shí)，采樣器應(yīng)距地面高度33cm，離門窗及人員流動(dòng)1m以上，且采樣器與采樣者要保持一定距離(50cm)，防止采樣者自身細(xì)菌被吸入采樣器而影響檢測(cè)結(jié)果。室外采樣要根據(jù)該地區(qū)氣象、交通、大氣污染程度、建筑物布局、有無(wú)樹(shù)林等進(jìn)行合理選點(diǎn)，選點(diǎn)數(shù)不定，每個(gè)點(diǎn)采樣高度1.5m以上?？梢砸粋€(gè)點(diǎn)同時(shí)放置兩個(gè)平皿，以平均菌落數(shù)代表該點(diǎn)的菌落數(shù)。
③暴露平血時(shí)間：
原則是保證客觀反映采樣點(diǎn)情況，采樣后平皿中生長(zhǎng)的菌落數(shù)要便于準(zhǔn)確計(jì)數(shù)，太多以至于無(wú)法計(jì)數(shù)將造成較大偏差，一般潔凈室內(nèi)暴皿時(shí)間可在5～30min，一般室內(nèi)較潔凈的地方，多采用暴皿5min即可。
?、芘囵B(yǎng)：
細(xì)菌樣品35～37℃培養(yǎng)48h，真菌樣品置28℃培養(yǎng)72h。
2.4JWL型采樣器
2.4.1結(jié)構(gòu)： 由采樣頭、流量計(jì)、抽氣泵、電源電路4部分構(gòu)成。
2.4.2特點(diǎn)： ①采樣的平皿可以轉(zhuǎn)動(dòng)，使平皿上菌落均勻分布;
?、诮灰恢绷鲀捎?，應(yīng)用簡(jiǎn)便;
?、圩詣?dòng)按時(shí)采樣，可采細(xì)菌和病毒;
④但對(duì)空氣中占大多數(shù)的粒子捕獲率低。
2.4.3操作步驟： ①平皿制備
細(xì)菌用普通瓊脂，真菌用選擇性培養(yǎng)基(如察氏培養(yǎng)基)。平皿要求厚薄均勻，表面水平，加培養(yǎng)基量4.5ml，瓊脂濃度1.8%～2.4%為宜。
?、诓蓸酉嚓P(guān)參數(shù)的調(diào)整
電源，220V，備24V直流蓄電池;流量調(diào)節(jié)，25～30L/min;空氣壓力，采樣系統(tǒng)98～245kPa，電氣系統(tǒng)為86.6～106.6kPa;采樣時(shí)間，一次不得超過(guò)15min;采樣高度，1.0～1.5m[2]。
?、叟囵B(yǎng)
同Andersen采樣法。
參考文獻(xiàn)
[1]吳冬檸，韋彩嬌，余波.百色城區(qū)高校大學(xué)生宿舍空氣微生物的監(jiān)測(cè)與分析.右江民族醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2013，35(05)：667-667.
[2]談書勤，胡貴方，顧大勇.空氣微生物氣溶膠富集、檢測(cè)與空氣消毒技術(shù)研究進(jìn)展.中國(guó)消毒學(xué)雜志，2012，29(12)：1115-1120.
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