醫(yī)學檢驗乙肝論文范文
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乙肝病毒攜帶者是指身體內(nèi)攜帶乙肝病毒的人。下面是學習啦小編為大家整理的醫(yī)學檢驗乙肝論文,供大家參考。
醫(yī)學檢驗乙肝論文篇一
乙型肝炎病毒大蛋白檢測及其臨床意義
醫(yī)學檢驗乙肝論文內(nèi)容
乙型肝炎病毒(HBV,hepatitis B virus)大蛋白存在于感染性顆粒(Dane顆粒)和亞病毒管狀顆粒上,是病毒形成完整外膜的重要標志,與病毒復制密切相關,具有反式激活作用,并與病毒顆粒從細胞內(nèi)釋放有關[1]。有研究表明HBV 大蛋白具有雙重跨膜拓撲結(jié)構(gòu)[2],針對HBV大蛋白特殊構(gòu)象制備的單克隆抗體,可以更準確地檢測血清中乙肝病毒外膜大蛋白。為了解乙肝患者血清中HBV大蛋白與HBV DNA的相關性,我們對179例HBV感染者血清HBV大蛋白進行了檢測。
1 材料與方法
1.1 研究對象 179例病例為本院2008年6月-2009年11月住院患者,男性122例,女性57例,年齡17-65歲,平均年齡為36±12.5歲,診斷標準符合2000年中華醫(yī)學會傳染病與寄生蟲病學分會、肝病學分會聯(lián)合修訂的“病毒性肝炎防治方案”中病毒性肝炎診斷標準。
1.2標本來源 血液標本由真空采血管采集、分離血清后凍存于-20℃保存。
1.3主要試劑 HBV DNA檢測采用廣州中山大學達安基因股份有限公司試劑;HBV“二對半”檢測采用時間分辨熒光免疫分析法,試劑購置蘇州新波生物技術有限公司;HBV大蛋白定量檢測試劑由北京熱景生物技術有限公司提供。
1.4主要方法 HBV-LP檢測試劑應用結(jié)構(gòu)生物學和免疫學技術,篩選出針對乙型肝炎病毒大蛋白前S區(qū)立體構(gòu)象型表位的高特異性、高親和力的單克隆抗體,并在微孔條上預包被,配以辣根過氧化物酶標記抗體,TMB顯色,采用雙抗體夾心法原理檢測。
1.5統(tǒng)計學處理 采用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計分析,HBV-LP和HBV DNA陽性檢出率比較采用配對計數(shù)資料x2檢驗。
2 結(jié)果
2.1HBV DNA與LP陽性率比較 179例HBV感染者血清同步檢測HBV DNA和HBV LP,HBV DNA(+)144例(80.4%),HBV LP(+)145例(81.0%),其中HBV DNA(+)、HBV LP(+)126例,HBV DNA(+)、HBV LP(-)18例,HBV DNA(-)、HBV LP(+)19例,HBV DNA(-)、HBV LP(-)16例,以HBV DNA和HBV LP作為判斷病毒復制的指標,差異無統(tǒng)計學意義 (x2=0.01,P>0.05)。
2.2 HBV LP與HBeAg陽性率的比較 144例HBV DNA陽性患者中,HBV LP(+)126例(87.5%),HBeAg(+)73例(50.7%),其中HBV LP(+)、HBeAg(+)65例,HBV LP(+)、HBeAg(-)61例,HBV LP(-)、HBeAg(+)8例,HBV LP(-)、HBeAg(-)10例,以HBV DNA和HBeAg作為判斷病毒復制的指標,差異有統(tǒng)計學意義(x2=81.3,P<0.001)。
3 討論
目前HBeAg和HBV DNA水平是反映患者乙肝病毒復制的主要指標,其中有HBV DNA定量檢測對抗病毒治療效果及預后判斷尤其重要。但在實際過程中,往往出現(xiàn)HBV病毒變異,使得患者血清中保留著低水平的HBV DNA。Michael Bruns等[3]通過鴨肝模型研究也發(fā)現(xiàn),含有嗜肝病毒血清的感染性不僅依賴于具有感染性的Dane顆粒的多少,而且還依賴于缺乏核酸、富含大蛋白的的亞病毒顆粒(SVPS,subviral particles)的數(shù)量,這些顆粒能夠顯著增強細胞內(nèi)的病毒復制和基因表達。HBV大蛋白包括HBsAg、PreS1、PreS2蛋白,是乙肝病毒Dane顆粒和亞病毒顆粒的主要包膜成份,與乙肝病毒復制密切相關,乙肝病毒大蛋白的檢測結(jié)果是反映患者血清中是否存在Dane顆粒和亞病毒顆粒,因而對判定HBV感染者體內(nèi)HBV復制或傳染性可能具有更重要的意義,文獻表明前S蛋白具有復雜的跨膜拓樸結(jié)構(gòu)[2],利用針對蛋白線性表位制備的單克隆抗體來檢測血清大蛋白,往往容易造成漏檢[4],我們采用針對HBV大蛋白特殊構(gòu)象制備的單克隆抗體對179例HBV感染者血清中HBV大蛋白檢測,結(jié)果顯示HBV LP陽性率和HBV DNA陽性率差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),因而可以作為反映病毒復制情況的一個血清學指標,在HBV DNA陰性的標本中有19例HBV LP陽性,原因可能是在檢測HBV LP時不僅能檢測到Dane顆粒,還能檢測到Dane顆粒以外的亞病毒顆粒,亞病毒顆粒數(shù)量水平較高,在血液中的消退時間也晚于Dane顆粒[5],另一方面是本實驗中應用的熒光定量PCR試劑靈敏度較低造成低水平的HBV DNA漏檢。
傳統(tǒng)的觀念認為HBeAg陽性表明乙肝病毒感染者體內(nèi)病毒復制活躍,病毒數(shù)量多,傳染性強,HBeAg轉(zhuǎn)陰往往預示著HBV復制的停止,后來的研究表明,在HBeAg陰性的慢性乙型肝炎中,由于病毒DNA發(fā)生了前C區(qū)或BCP區(qū)的變異,導致了HBeAg合成障礙[5]。我們的實驗結(jié)果顯示HBV LP陽性率87.5%,明顯高于HBeAg陽性率50.7%(P<0.001),顯然在判斷病毒復制和傳染性方面,HBV LP比HBeAg具有明顯的意義,在不具備HBV DNA檢測條件的基層醫(yī)院,HBV LP可以用作判斷病毒復制的理想血清學指標。
綜上所述,HBV大蛋白檢測操作簡便、快速、可以作為病毒復制的免疫學指標,適合在基層醫(yī)院推廣應用。
醫(yī)學檢驗乙肝論文文獻
[1]Bang G, Kim KH, Guarnieri M, Zoulim F, Kawai S, Li J, Wands J, Tong S. Effect of mutating the two cysteines required for HBe antigenicity on hepatitis B virus DNA replication and virion secretion. Virology 2005;332(1):216-224.
[2]Lambert C.et al. Assessment of determinants affecting the dual topology of hepadnaviral lare envelope proteins J.General Virology 2004, 85:1221-1225.
[3]Bruns M, Miska S, Will H. et al. Enhancement of hepatitis B Virus infectionbynoninfectionssubviral particles .J Virol,1998,76:1462-1468.
[4]彭建明,李金明.病毒樣顆粒在免疫測定中的應用研究進展[J].中華檢驗醫(yī)學雜志,2005,28:214-216.
[5]Carman WF, Jacyna MR, Hanziyannis, et al.Mutation preventing formation of hepatitis B e antigen in patients with chronic hepatitis B virus infection. Lancet 1989
醫(yī)學檢驗乙肝論文篇二
慢性乙型肝炎的臨床分析與治療
醫(yī)學檢驗乙肝論文摘要
【摘要】 慢性乙肝病毒感染因患者感染時年齡、感染遺傳因素、飲酒、感染病毒數(shù)量、準種及機體免疫狀態(tài)等不同呈不同的臨床表現(xiàn)與檢測結(jié)果。非活動性乙肝表面抗原攜帶:乙肝表面抗原陽性,有或無乙肝核心抗體,乙肝病毒DNA檢測不到,活檢顯示肝臟無炎癥,一年內(nèi)連續(xù)隨訪3次以上,丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶均在正常范圍。慢性乙肝病毒攜帶:檢測到乙肝病毒DNA,乙肝e抗原陽性或陰性,肝功能正常,一年內(nèi)連續(xù)隨訪3次以上,丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶均在正常范圍。隱匿性乙型肝炎:血清乙肝表面抗原陰性,血清或肝組織中有乙肝病毒DNA,有慢性乙型肝炎表現(xiàn);肝組織活檢能檢測到乙肝病毒DNA;約20%隱匿性慢性乙型肝炎除乙肝病毒DNA陽性外,其余乙肝病毒血清學標志物均為陰性。慢性乙型肝炎:急性肝炎病程超過半年或根基肝組織病理學、體征、化驗及B超檢查綜合分析符合慢性乙型肝炎表現(xiàn)者。
醫(yī)學檢驗乙肝論文內(nèi)容
【關鍵詞】 慢性乙型肝炎 臨床治療分析
硫普羅寧為一種新型的含巰基類化合物,在參與機體生化代謝方面具有重要作用,可以改善肝細胞功能,對抗各類肝損傷負效應。我們應用新誼藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)的硫普羅寧(凱西萊)治療慢性乙型肝炎56例,取得較為滿意的療效,現(xiàn)報道如下。
1 臨床資料
1.1一般資料:100例慢性乙型肝炎患者均為2005年10月~2009年10月住院患者,全部病例均HBsAg、HBeAg和/或HBV DNA陽性,且肝功能反復異常。隨機分為治療組和對照組個50例。
1.2治療方法:包括抗病毒、免疫調(diào)節(jié)、抗炎保肝、降酶治療。慢性肝炎重度在抗炎保肝、降酶治療基礎上再應用抗病毒治療,而慢性重型肝炎只能在維護肝功能前提下應用核苷類類似物抗病毒治療,且只能選快速、高效的抗病毒藥物,如恩替卡韋、替比夫定。對照組給予丹參、維生素、肌苷、強力寧等藥物及對癥治療,治療組在對照組治療基礎上加用硫普羅寧,用法為硫普羅寧:100~200mg加入5%葡萄糖250rnl中靜脈滴注每日1次。兩組療程均為50天。
1.3嚴格把握抗病毒適應癥
一般適應癥:一、乙肝病毒DNA≥105拷貝/毫升(乙肝e抗原陰性者≥104拷貝/毫升)。二、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶≥2ULN(正常值上限),如用干擾素治療丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶≤10ULN,血清膽紅素<2ULN。三、如丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶<2ULN,但肝組織學顯示諾迪爾肝炎活動指數(shù)≥4或≥G2炎癥壞死。應注意排除由藥物、酒精和其他因素所致的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶升高。
1.4加強病情監(jiān)測和效果預測
目前抗病毒藥物分為干擾素與核苷(酸)類似物兩大類。
1.4.1干擾素:治療前應檢測肝腎功能、血常規(guī)、甲狀腺功能、血糖,并排除自身免疫性疾病、妊娠、癲癇等。治療6個月時乙肝病毒DNA定量下降時考慮更換核苷類似物或核苷酸類似物,療效好可延長治療時間。
1.4.2核苷(酸)類似物:應用范圍較寬,可用于慢性肝炎、重型肝炎、失代償期肝硬化,療程一般較長,且存在耐藥潛在危險。應用3~6個月時復查乙肝病毒DNA定量,若下降幅度小,可提前更換其他核苷類似物。若用阿德福韋,每半年應復查腎功能。應用核苷(酸)類似物時,前3個月應每月復查生化學指標、血清學標志、乙肝病毒DNA,此后每3個月復查一次。如達到乙肝病毒DNA定量低于最低檢出限、肝功能正常、乙肝e抗原血清轉(zhuǎn)換、乙肝e抗原陽性慢性乙型肝炎患者需鞏固1年,乙肝e抗原陰性患者應鞏固1年半,總療程至少30個月。 1.5特殊人群的慢性乙型肝炎治療
1.5.1合并應用化療藥物和免疫抑制劑、肝硬化患者只要乙肝病毒DNA陽性,無論丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶是否升高均應抗病毒治療。用拉米夫定100毫克,每天1次,療程較長。
1.5.2肝移植患者最好一開始采用拉米夫定及阿德福韋聯(lián)合治療,以減少耐藥的發(fā)生。
1.6觀察指標:治療前后分別抽血化驗TBiL、ALT、AST、GGT,并記錄臨床癥狀、體征變化及不良反應。
1.7統(tǒng)計學處理:所得結(jié)果應用SPSS統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計,計數(shù)資料采用x2檢驗,計量資料采用t檢驗。
2 結(jié)果
2.1療效標準:療效評價完全有效:主要癥狀、體征消失,肝功能各項指標均恢復正常,HBV—DNA轉(zhuǎn)陰;部分有效:主要癥狀、體征明顯改善,肝功能各項指標比原值下降60%以上,HBV—DNA陰轉(zhuǎn)或定量下降;無效:癥狀體征無好轉(zhuǎn)或肝功能及病毒指標未達上述有效標準。顯效:治療結(jié)束后,臨床癥狀消失肝功能恢復正常;有效:臨床癥狀消失或明顯減輕,Tbit、ALT、AST、GGT下降大于治療前2/3;無效:癥狀無好轉(zhuǎn),TBiL、ALT、AST、GGT下降小于治療前的2/3。
2.2兩組療效比較:療程結(jié)束后,對照組顯效11例(19.6%),有效23例(41%),無效16例(39%),總有效率60.7%;治療組顯效38例(82%),有效7例(8.9%),無效5例(8.9%),總有效率91.1%。治療組療效優(yōu)于對照組(x2=28.9 P<0.05)。
2.3不良反應:治療組56例中,有1例出現(xiàn)輕度皮疹,3例出 料顯示硫普羅寧對慢性乙型肝炎具有較好的療效。治療后現(xiàn)皮膚瘙癢,經(jīng)對癥處理后均能堅持治療。
3 討論
目前認為慢性乙型肝炎的發(fā)病機制,主要是由于HBV病毒感染后,在肝細胞大量復制,HBsAg、HBeAg、HBeAg等抗原刺激機體免疫系統(tǒng),產(chǎn)生針對被感染肝細胞的免疫病理損害。由于缺乏根治病毒的有效方法,免疫病理過程持續(xù)存在?;颊卟∏檫w延不愈、反復發(fā)作,可進展為肝硬化乃至惡變?yōu)楦渭毎?/p>
硫普羅寧具有穩(wěn)定肝細胞膜、調(diào)節(jié)免疫功能等作用,阻斷慢性乙型肝炎病情遷延的關鍵因素,減少肝細胞的破壞,控制肝纖維化的進展,促進患者的癥狀恢復,延緩和阻止病情進展,最終可能延緩肝硬化的發(fā)生及降低肝癌的發(fā)病率。
硫普羅寧為一種含游離巰基的甘氨酸衍生物,實驗證明,該藥具有降低肝細胞或線粒體.ATP酶活性,提高細胞A耶含量,恢復電子傳遞功能,改善肝細胞結(jié)構(gòu)和功能,抑制肝細胞線粒體過氧化脂質(zhì)體形成,保護肝細胞膜,促進肝細胞的修復和再生,參與肝細胞蛋白質(zhì)、糖代謝,維持肝細胞內(nèi)谷胱甘肽含量的作用,從而為本品治療各種肝病提供了理論基礎。本資料顯示硫普羅寧對慢性乙型肝炎具有較好的療效。治療后,Tbit、ALT、AST、GGT值較前明顯下降(P<0.05),用藥安全,不良反應輕微。提示硫普羅寧能有效地穩(wěn)定肝細胞膜、線粒體膜等,起到了較好的保肝護肝作用,值得在臨床推廣應用。
醫(yī)學檢驗乙肝論文文獻
[1]唐望先,杜荔菁,張文英等.硫普羅寧對D一氨基半乳糖所致肝損害保護作用.中華肝臟病雜志,1997,5:52-53.
[2]陳新謙,金有豫,湯光主編.新編藥物學.第15版.人民衛(wèi)生出版社,2005:473
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