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HPLC法測(cè)定寧夏產(chǎn)四種柴胡中kaerophyllin的含量

時(shí)間: 趙潔 尚明遠(yuǎn) 王英華1 分享

摘要 HPLC法測(cè)定寧夏產(chǎn)四種柴胡中木脂素類成分(kaerophyllin)的含量,用甲醇提取后進(jìn)樣。色譜條件:ODS-C18柱 (150mm×6mm),流動(dòng)相為甲醇-水(70∶30),測(cè)定波長328nm。結(jié)果表明寧夏產(chǎn)小葉黑柴胡、短莖柴胡、空心柴胡、秦嶺柴胡中均含有 kaerophyllin。

關(guān)鍵詞:HPLC法;kaerophyllin;寧夏產(chǎn)柴胡

  我國有20余種柴胡屬植物供藥用,寧夏有10種〔1〕均含有柴胡皂苷a.d。小葉黑柴胡中有較高含量的木脂素類成分,是區(qū)別于北柴胡的顯著特點(diǎn)〔2〕。為系統(tǒng)地考察柴胡的質(zhì)量,筆者對(duì)寧夏產(chǎn)四種柴胡中Kaerophyllin進(jìn)行了含量測(cè)定。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 LC-6A高效液相色譜儀(日本)。

1.2 試藥 Kaerophyllin(日本東邦大學(xué)藥學(xué)部分離,經(jīng)UV,IR,MS,1H-NMR,13C-NMR鑒定);柴胡〔采集于寧夏固原縣,寧夏藥品檢驗(yàn)所邢世瑞主任藥師鑒定為:北柴胡(B.chinense DC),小葉黑柴胡(B.smithii wolff var.parvifolium Shan et Y.Li),短莖柴胡(B.pusillum Krylov),空心柴胡(B.longicaule var.franchelii Boiss),秦嶺柴胡(B.longicaule var.giraldii wolff)〕。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱Shimpack CLC-ODS-C18(150mm×6mm),流動(dòng)相:甲醇-水(70∶30),流速1ml/min,進(jìn)樣量15μl,檢測(cè)波長328nm。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線 精密稱取Kaerophyllin 5mg,用甲醇溶解定容于10ml量瓶中,制成標(biāo)準(zhǔn)溶液;精密吸取2,6,10,14,18μl注入高效液相色譜儀,以進(jìn)樣量對(duì)峰高回歸得方程為 Y=0.065+0.346C(r=0.9961),線性范圍為1~9μg。

2.3 回收率試驗(yàn) 精密稱取北柴胡粉末0.5g,加入Kaerophyllin 1.0260mg,用甲醇25ml 40℃溫浸20min后,超聲提取30min,過濾;重復(fù)兩次,揮去甲醇,再用甲醇4ml溶解后;過濾,置5ml量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,搖勻,微孔濾膜過濾(0.45μm);取濾液進(jìn)樣15μl,計(jì)算回收率為97.1%,RSD=2.1%(n=5)。
2.4 樣品含量測(cè)定 精密稱取4種柴胡粉末各0.5g。用甲醇25ml 40℃溫浸20min后,按上述條件進(jìn)行樣品制備和含量測(cè)定,結(jié)果見圖1、表1。

3 小結(jié)

  寧夏產(chǎn)小葉黑柴胡、短莖柴胡、秦嶺柴胡、空心柴胡均含有Kaerophyllin,且含量較高,北柴胡中只有痕量。該實(shí)驗(yàn)對(duì)綜合評(píng)價(jià)柴胡的質(zhì)量具有參考價(jià)值。
表1 各柴胡中Kaerophyllin的含量(n=5)

藥  材Kaerophyllin(%)
北柴胡痕量
小葉黑柴胡0.53
短莖柴胡0.76
秦嶺柴胡0.39
空心柴胡0.21

A-kaerophyllin B-小葉黑柴胡 C-短莖柴胡
D-空心柴胡 E-秦嶺柴胡
參考文獻(xiàn)

〔1〕 邢世瑞主編.寧夏中藥資源.銀川:寧夏人民出版社,1987:47
〔2〕 尚明遠(yuǎn),袁本香,王英華,等.HPLC法測(cè)定寧夏產(chǎn)柴胡中柴胡皂苷a.d的含量.西北藥學(xué)雜志,1998,13(4):153
〔3〕 王英華,尚明遠(yuǎn),邢世瑞,等.小葉黑柴胡化學(xué)成分比較研究簡報(bào).寧夏醫(yī)學(xué)雜志,1996,18(增刊):9

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