殺菌劑對(duì)玉米頂腐病菌的抑菌效果測(cè)定分析

　　摘要：室內(nèi)抑菌、毒力測(cè)定表明，不同殺菌劑對(duì)玉米(Zea mays L.)頂腐病菌(Fusarium subglutinans)菌絲生長(zhǎng)的抑制作用不同;玉米頂腐病菌對(duì)化學(xué)殺菌劑表現(xiàn)敏感，但是敏感程度不同。篩選出10%環(huán)唑醇、10%丙環(huán)唑、12.5%腈菌唑、50%退菌特等對(duì)玉米頂腐病菌抑制效果較好的藥劑，可作為防治該病害的首選藥劑。

　　關(guān)鍵詞：殺菌劑;玉米(Zea mays L.);頂腐病菌(Fusarium subglutinans);抑菌效果

　　玉米(Zea mays L.)頂腐病是世界玉米生產(chǎn)上的重要病害，也是我國(guó)玉米生產(chǎn)上的主要病害之一，在我國(guó)各地都有不同程度的發(fā)生，是制約玉米生產(chǎn)的重要因素。玉米頂腐病于1998年在遼寧省阜新地區(qū)首次被發(fā)現(xiàn)，是我國(guó)玉米生產(chǎn)上發(fā)生的一種新病害，在遼寧、吉林、黑龍江、甘肅、新疆等省(自治區(qū))嚴(yán)重發(fā)生，許多地塊因此病造成毀種。近年來(lái)該病的發(fā)生有上升趨勢(shì)，2006年在遼寧、吉林等地突發(fā)流行，重病田塊發(fā)病率高達(dá)50%。生產(chǎn)上對(duì)玉米頂腐病的防治研究報(bào)道甚少。近年來(lái)的生產(chǎn)實(shí)踐表明，在種植特用玉米及玉米制種田該病發(fā)生較嚴(yán)重時(shí)采用化學(xué)防治也有一定作用。為此，我們選用目前生產(chǎn)上較常使用的農(nóng)藥進(jìn)行藥劑對(duì)菌絲擴(kuò)展抑制作用試驗(yàn)，以期篩選出對(duì)該病有較好防效的藥劑，供生產(chǎn)上防病應(yīng)用。

　　1 材料與方法

　　1.1 材料

　　1.1.1 菌株 供試菌株玉米頂腐病致病菌亞黏團(tuán)鐮孢菌(Fusarium subglutinans)是從遼寧省黑山縣采集的玉米頂腐病病株按常規(guī)組織分離法進(jìn)行分離培養(yǎng)獲得的，經(jīng)純化培養(yǎng)后冷藏備用。

　　1.1.2 殺菌劑 供試的16種殺菌劑名稱、應(yīng)用濃度及來(lái)源見(jiàn)表1。

　　1.2 方法

　　殺菌劑抑菌效果測(cè)定：采用菌絲生長(zhǎng)速率測(cè)定法，供試藥劑分別用無(wú)菌水稀釋成所需濃度藥液，將PDA培養(yǎng)基加熱熔化，待其冷卻至45 ℃左右時(shí)，取1 mL藥液加入到9 mL PDA培養(yǎng)基中，制成含不同藥劑的培養(yǎng)基，充分搖勻后迅速倒入滅菌的直徑9 cm的培養(yǎng)皿中，以加入等體積無(wú)菌水的無(wú)藥劑的PDA平板為對(duì)照。待培養(yǎng)基凝固后，用打孔器在菌落邊緣切取直徑7 mm的菌碟塊，菌絲面朝下置于含藥PDA平板中央，每皿1塊，每處理3次重復(fù)，置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 5 d后，用十字交叉法測(cè)量菌落直徑，并計(jì)算不同藥劑處理對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制率，分析比較不同殺菌劑對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響。

　　菌絲生長(zhǎng)抑制率計(jì)算公式：

　　菌絲生長(zhǎng)抑制率=

　　■×100%

　　不同藥劑的毒力曲線測(cè)定：從上述的16種殺菌劑中初步篩選出對(duì)菌絲生長(zhǎng)有較強(qiáng)抑制作用的藥劑進(jìn)行抑菌測(cè)定。每種藥劑設(shè)5個(gè)濃度，用無(wú)菌水將藥劑配成10倍于試驗(yàn)濃度的系列濃度梯度藥液。取1 mL藥液與9 mL PDA培養(yǎng)基混合獲得系列濃度的含藥培養(yǎng)基，從菌落邊緣截取直徑為5 mm的菌絲塊置于含藥平板中央，每皿1塊，每種藥劑每個(gè)濃度設(shè)置3次重復(fù)，以加入等體積無(wú)菌水的無(wú)藥劑的PDA平板為對(duì)照。置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5 d后，用十字交叉法測(cè)量菌落直徑，計(jì)算各濃度含藥培養(yǎng)基對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制率，計(jì)算出每種藥劑的毒力回歸方程及EC50。

　　具體方法：將抑制率轉(zhuǎn)化為抑制率機(jī)率值，以藥劑濃度的對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo)，以抑制率機(jī)率值為縱坐標(biāo)，利用最小二乘法分別求出各藥劑的毒力回歸方程Y=bX+a，把Y=5(抑制率為50%的機(jī)率值)代入各毒力方程求出X，再轉(zhuǎn)換成有效中濃度(EC50)，最后以EC50值來(lái)衡量殺菌劑對(duì)病菌菌絲毒力的大小。

　　2 結(jié)果與分析

　　2.1 不同藥劑對(duì)玉米頂腐病菌絲生長(zhǎng)的抑制效果

　　菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定結(jié)果(表2)表明，不同藥劑對(duì)病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制效果存在顯著差異。在供試的16種藥劑中，以10%環(huán)唑醇、10%丙環(huán)唑、12.5%腈菌唑、50%退菌特對(duì)病菌的抑制效果最好，抑制率達(dá)到100%;其次是75%百菌清，抑菌率達(dá)88.9%;50%多菌靈的抑制作用最差，僅有8.3%。

　　2.2 不同藥劑對(duì)玉米頂腐病菌的EC50值比較

　　各單劑毒力回歸方程、斜率、EC50和相關(guān)系數(shù)結(jié)果見(jiàn)表3。各供試藥劑對(duì)玉米頂腐病菌的EC50之間存在差異，即表明各藥劑對(duì)玉米頂腐病菌的毒力存在一定差異。環(huán)唑醇的抑菌效果最好，毒力最強(qiáng)，EC50最小，僅為1.51 μg/mL;腈菌唑、丙環(huán)唑的EC50值分別為1.86、2.59 μg/mL。說(shuō)明這2種藥劑對(duì)玉米頂腐病菌的毒力較強(qiáng)，抑菌效果較好;退菌特的EC50值為11.49 μg/mL，說(shuō)明該藥劑對(duì)野生型病菌的抑制效果相對(duì)較差，毒力相對(duì)較弱。

　　2.3 玉米頂腐病菌對(duì)不同藥劑的敏感性比較

　　將試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行相關(guān)回歸分析得出每種藥劑的回歸方程和斜率(表3)?；貧w方程的斜率與殺菌劑對(duì)病菌的敏感性成正相關(guān)，斜率越大，藥劑隨著濃度的增大抑菌效果提高的越快。在供試的4種藥劑中，退菌特的斜率最大，其值為0.982 6，說(shuō)明病菌對(duì)該藥劑的敏感性最高;其次依次為丙環(huán)唑、腈菌唑，斜率值分別為0.727 9、0.670 3，說(shuō)明病菌對(duì)這2種藥劑的敏感性較高;環(huán)唑醇的斜率值為0.627 5，是供試藥劑中斜率最小的，說(shuō)明玉米頂腐病病菌對(duì)這種藥劑的敏感性較低。

　　室內(nèi)毒力測(cè)定中藥劑的EC50值越小、斜率越大，說(shuō)明病菌對(duì)藥劑的敏感性越高，抑菌效果越好。綜合考慮供試藥劑的EC50值和斜率，結(jié)果表明對(duì)玉米頂腐病菌抑制效果最好的藥劑為丙環(huán)唑和環(huán)唑醇，可作為防治該病害的首選藥劑。

　　3 小結(jié)

　　對(duì)16種供試藥劑的室內(nèi)抑菌測(cè)定試驗(yàn)結(jié)果表明，不同藥劑對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制作用差異顯著，以10%環(huán)唑醇、10%丙環(huán)唑、12.5%腈菌唑、50%退菌特的抑制效果最好，抑制率達(dá)到100%。

　　室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果表明，玉米頂腐病菌對(duì)化學(xué)藥劑的敏感程度不同。綜合考慮供試藥劑的EC50值和斜率，對(duì)玉米頂腐病菌抑制效果較好的藥劑為10%環(huán)唑醇、10%丙環(huán)唑、12.5%腈菌唑、50%退菌特，可作為防治該病害的首選藥劑。

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