中考生物知識點匯總
生物是指具有動能的生命體,是一個物體的集合,而個體生物指的是生物體,與非生物相對。下面是小編為大家?guī)淼闹锌忌镏R點,希望能幫到大家!
1.什么是細胞全能性?
細胞全能性(celltotipotency)比較權威的定義是1984年國際組織培養(yǎng)協(xié)會做出的:“細胞全能性為細胞的某種特征,有這種能力的細胞保留形成有機體所有細胞類型的能力”。這個定義比一般所說的概念“一個細胞中包含著這種生物的全部遺傳信息(基因),在適當?shù)臈l件下可以發(fā)育成一個完整的生物體”更基本和全面。它不但包含了培養(yǎng)細胞再生成植株的情況(分化成各種類型的細胞,并以一定形式構建成植物),同時也包含了培養(yǎng)細胞生產次生代謝物的情況(不分化或只分化成某種類型細胞,但仍留著分化為其他細胞類型的能力)。前者成為組織培養(yǎng)和轉基因植物需要進行植株再生的理論基礎,后者成為像微生物發(fā)酵一樣培養(yǎng)細胞,生產人們所需要的次生代謝產物的理論基礎,如通過紅豆杉的細胞培養(yǎng)生產紫杉醇。
2.植物組織培養(yǎng)技術是如何發(fā)展起來的?
技術和理論是一對孿生兄弟,相輔相成,技術手段的發(fā)明會促進理論的創(chuàng)新,理論的創(chuàng)新又會指導技術的實踐活動。植物組織培養(yǎng)也是如此。
早在1902年,哈伯蘭特(Haberlandt)提出高等植物的器官和組織可以不斷地分割,直至單個細胞的觀點,預言植物體細胞在適宜的條件下,有發(fā)育成完整植株的潛力,提出了植物細胞全能性的設想,并且用植物細胞組織進行了培養(yǎng)實驗。他雖然未能獲得再生植株,卻是植物組織培養(yǎng)的開創(chuàng)者。1902年他發(fā)表了著名論文《植物細胞離體培養(yǎng)實驗》,論文中提出的植物細胞全能性的理論是植物組織培養(yǎng)的理論基礎。
從哈伯蘭特提出植物細胞全能性的理論,到1958年斯圖爾德(F.C.Steward)等人第一次用胡蘿卜根的韌皮部細胞證實了植物細胞的全能性,用了整整56年。56年中許多科學家做的事情歸納起來都是在探索哈伯蘭特提出的“植物細胞在適宜條件下,有發(fā)育成完整植株的潛力”中的適宜條件。
20世紀60年代以后,植物組織培養(yǎng)進入了迅速發(fā)展階段,并逐步走向生產應用,如快繁脫毒、單倍體育種、種質資源保存、生產次生代謝產物等,也為人工種子、細胞融合、轉基因植物等奠定了基礎。
3.怎樣制備胡蘿卜培養(yǎng)基(供參考)?
(1)誘導胡蘿卜愈傷組織
在MS培養(yǎng)基[注]中加入質量分數(shù)為0.5mg/L的6-BA和質量分數(shù)為0.5mg/L的NAA
(2)誘導胡蘿卜叢芽
在MS培養(yǎng)基中加入質量分數(shù)為2mg/L的KT和質量分數(shù)為0.2mg/L的NAA
(3)誘導胡蘿卜生根
在1/2MS培養(yǎng)基中加入質量分數(shù)為0.1mg/L的NAA
[注]:MS培養(yǎng)基的配制方法見《選修1附錄3中八》。
4.植物組織培養(yǎng)中的愈傷組織是如何形成及再分化的?
植物組織培養(yǎng)中使用的外植體一般是高度分化了的細胞,在植物體中是不會再分裂繁殖的,只是執(zhí)行某種功能直至死亡。這些細胞在培養(yǎng)基上培養(yǎng)時會由原來的分化狀態(tài),變成分生狀態(tài)的細胞,分裂產生愈傷組織,這個過程稱為脫分化(dedifferentiation)過程。這種轉變在細胞的形態(tài)結構和生理生化上都會產生一系列變化。組織培養(yǎng)的研究結果表明分化細胞的脫分化需要兩個條件,即創(chuàng)傷和外源激素。
目前人們對于脫分化過程的本質還不清楚。分化細胞在細胞周期中是處于一種相對靜止狀態(tài)的細胞(G0期細胞),脫分化是要打破這種狀態(tài),使細胞進入細胞周期中的G1期,并沿著G1期→S期→G2期→M期的循環(huán)進行細胞分裂,形成愈傷組織?,F(xiàn)在發(fā)現(xiàn)細胞周期受基因調控,一種稱為編碼細胞周期依賴性激酶CDK(cycilindependentkinase)的基因和一種細胞周期蛋白(cyclin)可能與植物細胞脫分化的第一次分裂啟動有關。那么,什么因素誘導細胞周期調控基因的作用,培養(yǎng)實踐證明與外源激素有關。至于激素如何誘導以及誘導作用的過程目前仍不清楚,有待深入研究。分化細胞脫分化后細胞結構有兩點明顯的變化:一是在細胞內出現(xiàn)液泡蛋白;二是葉綠體轉變成原質體。
當細胞脫分化形成愈傷細胞后,經過一段時期的分裂,細胞群體變成不是一種細胞類型的均一群,又會產生分化,形成分生細胞或分生細胞團,由此再生成植株有兩條途徑:一是形成體細胞胚(功能類似于受精過程產生的胚),通過體細胞胚形成再生植株。二是走器官發(fā)生的途徑再生植株,分生細胞在一定的誘導條件下重建芽的分生組織,分化出芽后再生根,成為完整的植株。
5.為什么要在避光條件下培養(yǎng)愈傷組織?
對于植物組織培養(yǎng)來說,光照條件非常重要,包括光照強度、時間和波長。但在愈傷組織的誘導階段往往要暗培養(yǎng),而在分化再生的過程中一定要有光照。愈傷組織誘導階段的暗培養(yǎng)有利于細胞的脫分化產生愈傷組織,如果在光照條件下容易分化產生維管等組織,不利于產生大量的愈傷組織。
6.什么是人工種子?
人工種子(artificialseed)是指通過植物組織培養(yǎng)的方法獲得的具有正常發(fā)育能力的材料,外面包被著特定的物質,在適宜的條件下可以發(fā)芽成苗的植物幼體。人工種子的概念中包含的“具有正常發(fā)育能力的材料”通常是指胚狀體(目前國外有使用不定芽、頂芽和腋芽的),它可以由三種途徑產生:
(1)由已脫分化的外植體直接產生;
(2)由愈傷組織產生;
(3)由懸浮細胞培養(yǎng)產生。對胚狀體的基本要求是:①播種后能快速出苗;②根和芽幾乎同時生長,不產生愈傷組織;③同步化程度高;④活力強;⑤形成的幼苗的形態(tài)與生長要常。
“外面包被著特定的物質”是指人工種皮,制作人工種皮的材料有海藻酸鈉、明膠、樹脂、瓊脂糖、淀粉等。對人工種皮的要求是:能保持胚狀體的活力,有利于貯藏運輸和萌發(fā)。選取的材料要有韌性,耐壓,對胚狀體無毒害,含有胚狀體發(fā)芽所需要的營養(yǎng)成分或植物激素,還應含有殺菌劑,以防播種后微生物的侵害。
人工種子目前還存在不少問題。例如,現(xiàn)有重要經濟價值的植物產生胚狀體能力弱,難以形成同步化的有強活力的胚狀體;成本較高;運輸貯藏以及機械化播種問題也未解決。因此,現(xiàn)在很少有人以生產為目的進行人工種子的研制。
7.植物微型繁殖技術高效快速的實例有哪些?
植物脫毒(virus-free)和離體快繁(invitropropagation)是目前植物組織培養(yǎng)應用最多、最有效的方面。生產上許多無性繁殖作物均受到病毒的侵染,從而導致品種的嚴重退化、減產和降低品質。利用植物分生組織進行培養(yǎng)可以使新長成的植株脫去病毒。利用這種方法生產無病毒苗的農作物有馬鈴薯、甘薯、大蒜、草莓、蘋果、香蕉等,并已大規(guī)模應用于生產。離體快繁技術可以使一些植物的擴增速度比常規(guī)方法快數(shù)萬倍乃至百萬倍,而且產生的幼苗遺傳背景均一,重復性好,不受季節(jié)和地區(qū)限制。目前世界上已建成很多年產百萬苗木的組培工廠,成為一種新興產業(yè)。離體快繁技術在觀賞植物、園藝植物、經濟林木和無性繁殖作物上已得到廣泛應用。
8.植物體細胞雜交的過程是怎樣的?
體細胞雜交是克服植物有性雜交不親和性、打破物種之間的生殖隔離、擴大遺傳重組范圍的一種手段。操作過程包括:原生質體制備、原生質體融合、雜種細胞篩選、雜種細胞培養(yǎng)、雜種植株再生以及雜種植株鑒定等步驟。
原生質體制備是用纖維素酶、半纖維素酶和果膠酶將植物細胞壁分解掉,只留下細胞膜(質膜)包裹著細胞內含物。原生質體融合是指兩個原生質體的質膜重新組合排列形成一個質膜,其中含有兩個細胞核。在細胞工程中一般是誘導融合,形成的融合細胞中所含有的兩個細胞核是來自不同的物種,稱之為異核體(heterokaryon)。誘導融合的手段有化學誘導和物理誘導。在誘導因素的作用下形成的融合細胞進一步產生核融合,進行第一次有絲分裂。雜種細胞的篩選方法有:①細胞系互補的選擇方法,包括葉綠素缺失互補、營養(yǎng)缺陷互補和抗性互補等;②利用物理特異性差異的選擇方法:這是利用兩個原生質體物理特異性差異的一種選擇,包括原生質體的大小、顏色、浮密度等的不同來選擇;③利用生長特異性差異的選擇方法。需要注意的是上述選擇方法只適合部分雜交細胞的情況,有時無法選擇,就不加選擇地進行培養(yǎng)和再生成植株,然后對再生植株的雜種性狀進行鑒定。雜種細胞培養(yǎng)方法與原生質體的培養(yǎng)方法相似。體細胞雜種的鑒定方法有:①形態(tài)學鑒定。利用雜種植株與雙親在表現(xiàn)型上的差異進行比較分析,如葉片大小與形狀,花的形狀與顏色、葉脈、葉柄、花梗及表皮毛有無等;②細胞學鑒定。雜種植株細胞中的染色體數(shù)目是否比任何一方親本細胞中的染色體數(shù)目增多?理論上講如果染色體不丟失,雜種細胞中染色體數(shù)目應為雙親染色體數(shù)目之和。也可以用基因組原位雜交的分子細胞學方法進行鑒定;③同功酶鑒定。同功酶是功能相同的酶的多重分子形態(tài),它們是特異基因的產物。雜種細胞中的同功酶譜一般是雙親酶譜之和,但有時也會出現(xiàn)雙親沒有的新帶;④分子生物學鑒定。常用的方法有限制性片段長度多態(tài)性(RFLP)、隨機擴增多態(tài)性(RAPD)和擴增片段長度多態(tài)性(AFLP)等。
值得注意的是體細胞雜交尚存在一些問題:①親緣關系越遠,染色體排斥丟失的現(xiàn)象就越嚴重;②由于是兩個物種的全部遺傳物質的合并,各種基因都在其中,選擇符合需要的個體難度大;③有時缺乏選擇雜種細胞的有效方法。因此目前整體對稱融合的工作比較少,而是采用非對稱融合,即一方親本包括了全部遺傳物質,另一方親本只取一部分遺傳物質,如用不具有核的原生質體與之進行融合。
9.物理和化學方法誘導原生質體融合的基本原理是什么?
化學融合的機制:常用化學融合方法有高pH—高Ca2+法和聚乙二醇(PEG)法。高pH—高Ca2+法誘導原生質體融合的基本原理是中和原生質體表面所帶的電荷,使原生質體的質膜緊密接觸,從而有利于質膜的接觸融合。PEG處理原生質體可以使原生質體聚集促進融合,但PEG誘導融合的真正機制目前并不清楚。
物理融合的機制:常用方法為電融合法。此法是先將兩種原生質體以適當?shù)谋壤旌铣蓱腋∫?,將其滴入電融合小室中,給小室兩極以交變電流,使原生質體沿電場方向排列成串珠狀,接著給以瞬間高強度的電脈沖,使原生質體膜產生局部破損而導致融合。
10.工廠化生產人參皂甙的基本過程是什么?
第一步,選擇人參根作為外植體進行培養(yǎng),產生愈傷組織,經過培養(yǎng)選擇找到增殖速度快而且細胞內人參皂甙含量高的細胞株作為種質,其中一部分作為保存用,以備下一次生產用,一部分進行發(fā)酵生產。
第二步,將第一步選擇到的細胞株在發(fā)酵罐中的適合培養(yǎng)液中進行液體培養(yǎng),增加細胞數(shù)量。
第三步,將發(fā)酵罐中培養(yǎng)的細胞進行破碎,從中提取人參皂甙。
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