顯微鏡大光圈和小光圈的區(qū)別

顯微鏡大光圈和小光圈的區(qū)別：光圈大小、深度、分辨率、對比度等等，大光圈顯微鏡適用于觀察暗區(qū)域或需要快速對焦的樣品，而小光圈顯微鏡適用于觀察細節(jié)或需要高分辨率的樣品。

顯微鏡大光圈和小光圈的區(qū)別

1、光圈大小。大光圈相對于小光圈來說，其光圈開口的大小更大，可以讓更多的光線通過樣品并投射到目鏡中，從而增加樣品的亮度和清晰度。

2、深度。大光圈可以產(chǎn)生較淺的焦深度，而小光圈則產(chǎn)生較深的焦深度。這意味著在使用大光圈時，只有少數(shù)區(qū)域處于清晰狀態(tài)，而其他區(qū)域則模糊不清;而在使用小光圈時，更多的區(qū)域可以保持清晰。

3、分辨率。使用小光圈時，由于深度增加，樣品的分辨率也會更高。這是因為小光圈能夠減少焦散現(xiàn)象，從而提高分辨率。

4、對比度。使用小光圈可以提高對比度，因為深度增加可以減少光的散射，從而使樣品的細節(jié)更加清晰。

顯微鏡的使用方法

1.調(diào)節(jié)亮度：由暗調(diào)亮，可以用大光圈，凹面鏡，調(diào)節(jié)反光鏡的角度。

2.將臨時裝片在載物臺上適當位置固定好。

3.低倍物鏡對準通光孔，使用粗準焦螺旋將鏡筒自上而下的調(diào)節(jié)，眼睛在側(cè)面觀察，避免物鏡鏡頭接觸到玻片而損壞鏡頭和壓破玻片。

4.左眼通過目鏡觀察視野的變化，同時調(diào)節(jié)粗準焦螺旋，使鏡筒緩慢上移，直至視野清晰為止。

5.如果在視野中沒有被觀察對象，可以移動裝片，原則為欲上反下，欲左反右。

6.如果不夠清晰，可以用細準焦螺旋進一步調(diào)節(jié)。

7.如果需要在高倍物鏡下觀察，可以轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器調(diào)換物鏡。如果視野較暗，可通過1的方法調(diào)節(jié);如果不夠清晰，可通過6的方法調(diào)節(jié)，但是不可以用4的方法。

8.使用完畢后，請調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)換器，使空鏡頭孔對著通光孔，使反光鏡豎起來，將鏡筒調(diào)至最低后裝入鏡箱。

顯微鏡的分類

1.普通光學顯微鏡：普通光學顯微鏡通常以自然光或燈光為光源，其波長約0.5μm.在最佳條件下，顯微鏡的最大分辨率為波長的一半，即0.25μm，而肉眼所能看到的最小形象為0.2mm，故在普通光學顯微鏡下用油鏡放大1000倍，可將0.25μm的微粒放大到0.25mm，肉眼便可以看清，一般細菌大于0.25μm，故用普通光學顯微鏡均能清楚看到。

2.暗視野顯微鏡：暗視野顯微鏡是用特制的暗視野集光器代替普通光學顯微鏡上的明視野集光器，由于暗視野集光器的中央為不透光的遮光板，光線不能直接射入鏡筒，故背景視野黑暗無光，而從集光器四周邊緣斜射到標本部位的光線，經(jīng)菌體散射后而進入物鏡。故在強光的照射下，可以在黑暗的背景中看到發(fā)亮的菌體，猶如夜空中的明亮星星。明暗反差提高了觀察的效果，多用于檢查不染色的活細菌和螺旋體的形態(tài)及運動觀察。

3.相差顯微鏡：在進行未染色標本檢查時，由于細菌的折旋光性與周圍環(huán)境的折旋光性相近，明暗對比不明顯。在普通光學顯微鏡下不易看清，用暗視野顯微鏡只能看到發(fā)亮的菌體輪廓，看不清內(nèi)部結(jié)構(gòu)。而相差顯微鏡依據(jù)光波穿過標本中密度不同的部位時，引起光相差異的原理，利用相差板的光柵作用，改變直射光的光相和振幅，將光相的差異轉(zhuǎn)換成光的強度的差異，使細菌中的某部分結(jié)構(gòu)比其他部分深暗，襯托出鮮明的對比。本法主要用于檢查不染色活細菌的形態(tài)及某些內(nèi)部結(jié)構(gòu)。

4.熒光顯微鏡：熒光顯微鏡以紫外光或藍紫光為光源，能激發(fā)熒光物質(zhì)發(fā)光使之成為可見光醫(yī)|學教|育網(wǎng)搜集整理。細菌經(jīng)熒光色素染色后，置于熒光顯微鏡下，即可激發(fā)熒光，因此在暗色的背景下可以看到發(fā)射熒光的細菌。由于紫外光與藍紫光的波長較短(0.3～0.4μm)，故分辨率得到進一步提高。熒光顯微鏡還廣泛應用于免疫熒光技術中。

5.電子顯微鏡：電子顯微鏡以電子流代替光源，其波長極短(約為0.005nm)，分辨能力大大提高，電磁圈代替普通顯微鏡的光學放大系統(tǒng)，放大倍數(shù)可達數(shù)萬至數(shù)十萬倍，能分辨lnm的物體，細菌的表面形態(tài)和內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)均能清楚地顯現(xiàn)。