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HPLC的常用術(shù)語解釋

時(shí)間: 澤燕681 分享

  高效液相色譜法(HighPerformanceLiquidChromatography\HPLC)又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。它是在生化和分析化學(xué)中常用的柱層析儀。接下來小編為大家整理了HPLC的常用術(shù)語解釋,希望對(duì)你有幫助哦!

  第一部分 色譜曲線

  1、色譜圖(chromatogram):色譜柱流出物通過檢測器系統(tǒng)時(shí)所產(chǎn)生的響應(yīng)信號(hào)對(duì)時(shí)間或流動(dòng)相流出體積的曲線圖,或者通過適當(dāng)?shù)?a href='http://www.zbfsgm.com/way/' target='_blank'>方法觀察到的紙色譜或薄層色譜斑點(diǎn)、譜帶的分布圖。

  2、(色譜)峰(chromatographic peak):色譜柱流出

  3、峰底(peak base):峰的起點(diǎn)與終點(diǎn)之間的連接的直線

  4、峰高(h ,peak height):色譜峰最大值點(diǎn)到峰底的距離(圖1 中的BE)。

  5、峰寬(W ,peak width):在峰兩側(cè)拐點(diǎn)(圖1 中的F ,G)處所作切線與峰底相交兩點(diǎn)的距離

  6、半高峰寬(W h/2 ,peak withd at half height):通過峰高的中點(diǎn)作平行于峰底的直線,此直線與峰兩側(cè)相交兩點(diǎn)之間的距離(圖1 中的HJ)。

  7、峰面積(A ,peak area):峰與峰底之間的面積

  8、拖尾峰(tailing peak):后沿較前沿平緩的不對(duì)稱的峰。

  9、前伸峰(leading peak):前沿較后沿平緩的不對(duì)稱的峰。(又叫伸舌峰、前延峰)

  10、假峰(ghost peak):除組分正常產(chǎn)生的色譜峰外,由于儀器條件的變化等原因而在譜圖上出現(xiàn)的色譜峰,即并非由試樣所產(chǎn)生的峰。這種色譜峰并不代表具體某一組分,容易給定性、定量帶來誤差。(又叫鬼峰)

  11、畸峰(distrorted peak):形狀不對(duì)稱的色譜峰, 前伸峰、拖尾峰都屬于這類。

  12、反峰(negative peak):也稱倒峰、負(fù)峰,即出峰的方向與通常的方向相反的色譜峰。

  13、原點(diǎn)(origin):紙或薄層板上滴加試樣部位的中心點(diǎn)

  14、斑點(diǎn)(spot):平面色譜法中,組分在展開和顯譜后呈現(xiàn)近似圓形或橢圓形的色區(qū)

  15、區(qū)帶(zone):在色譜柱、紙或薄層板上被分離組分所占的區(qū)域。

  16、復(fù)斑(multiple spot):一種組分展開后形成兩個(gè)或多個(gè)清晰斑點(diǎn)。

  17、區(qū)帶拖尾(zone tailing):由于物理、化學(xué)等作用的影響,一種組分在展開后形成的彗星形狀斑點(diǎn)。

  18、基線(base line):在正常操作條件下,僅有流動(dòng)相通過檢測器系統(tǒng)時(shí)所產(chǎn)生的響應(yīng)信號(hào)曲線。

  19、基線漂移(baseline drift):基線隨時(shí)間定向的緩慢變化。

  20、基線噪聲(N ,baseline noise):由于各種原因而引起的基線波動(dòng)。

  21、統(tǒng)計(jì)矩(moment):色譜流出曲線是組分在檢測器中濃度或質(zhì)量依時(shí)間的統(tǒng)計(jì)分布曲線,響應(yīng)值對(duì)應(yīng)于分布密度。組分在柱內(nèi)遷移時(shí)間 r 次冪的數(shù)學(xué)期望稱為流出曲線的 r 階原點(diǎn)矩。而組分在柱內(nèi)遷移時(shí)間與平均遷移時(shí)間差的 r 次冪的數(shù)學(xué)期望稱為流出曲線的 r 階中點(diǎn)矩。

  22、一階原點(diǎn)矩(first origin moment):組分在柱內(nèi)遷移時(shí)間的數(shù)學(xué)期望。當(dāng)流出曲線為對(duì)稱峰時(shí),即為組分的保留時(shí)間。

  23、二階中心矩( μ2 ,second central moment):二階中心矩為流出曲線的方差。定義為:μ2=E(t-Et)2 式中,E代表平均。

  24、三階中心矩(μ3 ,third central moment):定義為:μ3=E(t-Et)3

  可以表示流出曲線的不對(duì)稱程度。峰形對(duì)稱時(shí)μ3=0,前伸峰μ3<0 ,拖尾峰μ3>0.

  第二部分 分離模式

  1、液相色譜法(liquid chromatography ,LC):用液體作流動(dòng)相的色譜法。

  2、液液色譜法(liquid liquid chromatography,LLC ):將固定液涂漬在載體上作為固定相的液相色譜法。

  3、液固色譜法(liquid solid chromatography,LSC ):用固體(一般指吸附劑)作為流動(dòng)相的液相色譜法。

  4、正相液相色譜法(normal phase liquid chromatography ,NPLC):固定相的極性較流動(dòng)相的極性強(qiáng)的液相色譜法。

  5、反相液相色譜法(reversed phase liquid chromatography,RPLC ):固定相的極性較流動(dòng)相的極性弱的液相色譜法。

  6、柱液相色譜法(liquid column chromatography ):在柱管內(nèi)進(jìn)行組分分離的液相色譜法。

  7、高效液相色譜法(high performance liquid chromatography,HPLC ):具有高分離效能的柱液相色譜法。

  8、尺寸排除色譜法(size exclusion chromatography,SEC ):用化學(xué)惰性的多孔性物質(zhì)作為固定相,試樣組分按分子體積(嚴(yán)格來講是流體力學(xué)體積)進(jìn)行分離的液相色譜法。

  9、凝膠過濾色譜法:(gel filtration chromatography ):水或水溶液作為流動(dòng)相的體積排除色譜法。

  10、凝膠滲透色譜法:(gel permeation chromatography ,GPC):有機(jī)溶劑作為流動(dòng)相的體積排除色譜法。

  11、親和色譜法(affinity chromatography ):用連接在基體上的配位體做固定相,使其與蛋白質(zhì)或其他大分子發(fā)生可逆的高選擇性的相互作用,利用不同親和力進(jìn)行分離的液相色譜法。

  12、離子交換色譜法(ion exchange chromatography ,IEC):以離子交換作用分離離子型化合物的液相色譜法。

  13、離子色譜法(ion chromatography ):以含有某種特定離子的水溶液作為流動(dòng)相,流出液通過抑制柱(或不通過抑制柱),在降低流動(dòng)相背景信號(hào)的條件下用于分離離子的液相色譜法。

  14、離子抑制色譜法(ion suppression chromatography ):通過調(diào)節(jié)流動(dòng)相的PH值來抑制試樣組分的電離,以分離離子型化合物的液相色譜法。

  15、離子對(duì)色譜法(ion pair chromatography ):用形成離子對(duì)化合物進(jìn)行分離的液相色譜法。16、疏水作用色譜法(hydrophobic interation chromatography ):用適度疏水性的固定相,以含鹽的水溶液作為流動(dòng)相,借疏水作用分離生物大分子化合物的液相色譜法。

  17、制備液相色譜法(preparative liquid chromatography):用能處理較大量試樣的色譜系統(tǒng),進(jìn)行分離、切割和收集組分,以提純化合物的液相色譜法。

  18、平面色譜法(planar chronatography):在平面介質(zhì)上進(jìn)行組分分離的色譜法,也叫平板色譜法。

  第三部分 常用術(shù)語

  M:分子量

  MC:二氯甲烷(methylene chloride)

  MeOH:甲醇(methanol)

  MS:質(zhì)譜

  h:峰高

  HPLC:高效液相色譜

  ID:內(nèi)徑,dC

  A:吸收度(式3.1,3.2);也作面積

  ACN:乙腈(acetonitrile)

  B(%B):二元流動(dòng)相中的強(qiáng)溶劑(% v/v)

  C8,C18:烷基鍵合相的鍵長度(八烷基或十八烷基)

  CD:環(huán)糊精(cyclodextrin)

  CV:變異系數(shù)(通常以%表示);式15.3

  dC:色譜柱內(nèi)徑(cm)

  dP:顆粒直徑(μm)

  DAD:二極管陣列檢測器

  EC:電化學(xué)(檢測器)

  F:流速(ml/min)

  FL:熒光(檢測器)

  GS:梯度斜度參數(shù)(式8.2a);k*=20/GS

  IEC:離子交換色譜(ion-exchange chromatography)

  IPC:離子對(duì)色譜 (ion-paire chromatography)

  k:保留因子(式2.4)

  k*:梯度洗脫中,k的有效值或平均值(式8.1)

  ka,kZ:色譜圖中,首峰(a)和末峰(z)的k值

  L:色譜柱長度(cm)

  LC-MS:液相色譜-質(zhì)譜

  MTBE:甲基-叔-丁醚(methyl-t-butyl ether)

  N:色譜柱塔板數(shù)(式2.82.8b)

  N:噪音(式3.3,圖3.3)

  NARP:非水反相HPLC

  NPC:正相色譜

  P:色譜柱壓力降(通常以psi表示)(式2.9)

  pKa:酸或供質(zhì)子堿的酸性常數(shù)

  PAH:多環(huán)芳烴(polyaromatic hydrocarbon)

  RS:分離度(式2.1)

  RI:折光指數(shù)

  RPC:反相色譜

  S:信號(hào);式3.3;圖3.3;以及由式6.1定義的參數(shù)

  tD:延遲或滯留時(shí)間(min,用于梯度洗脫中);等于VD/F

  tG:梯度時(shí)間(min)

  tR:保留時(shí)間(min)(圖2.2);等于tO(1+k)

  tRa,tRz:色譜圖中首峰(a)與末峰(z)的保留時(shí)間,tR(min)(圖8.6a)

  tO:色譜柱死時(shí)間(min)(式2.5)

  t1,t2:相鄰譜峰1與譜峰2的保留時(shí)間(min)

  TEA:三乙胺(triethylamine)

  THF:四氫呋喃(tetrahydrofuran)

  UV:紫外光譜

  VD:延遲或滯留體積(mL);為梯度混合器與色譜柱人口之間的體積(包括混合器的體積)

  Vm:色譜柱死體積(mL)(式2.6);Vm為色譜柱內(nèi)部的流動(dòng)相體積,不包括附于固定相上的溶劑

  Vmax:最大樣品體積(mL)(式13.1)

  Va:樣品體積(mL)

  w:重量(mg);也作半峰高處的峰寬(min)

  wmax:不超載色譜柱的最大進(jìn)樣量(mg)(式2.17)

  wS:色譜柱的飽和容量(mg)(式13.4)

  W:峰底寬(min)(圖2.2)

  Wth:大進(jìn)樣量對(duì)峰底寬的貢獻(xiàn)(min)(式13.2)

  WO:小進(jìn)樣量的峰底寬(min)

  W1/2:半峰高處的峰寬(min)(圖1.1)

  a:分離因子,等于k2/k1,其中k2與k1分別為相鄰譜峰2和譜峰1的k值

  △tR:tRz-tR(min)

  △%B:梯度洗脫期間,%B的變化

  ε:摩爾吸收系數(shù)

  εo:正相HPLC 中溶劑或溶劑混合液的強(qiáng)度

  η:粘度(CP)

  <<不常有符號(hào)>>

  A,B,C:式2.11中的常數(shù);數(shù)值A(chǔ),B與C隨k值而變化,但改變其它條件或溶質(zhì)時(shí)基本不變

  A,B,C:式2.10中的常數(shù);數(shù)值A(chǔ),B與C隨條件和樣品而變化

  A,B,C:式2.10a中的常數(shù);數(shù)值A(chǔ),B與C隨條件和樣品而變化

  C:譜峰最大值處的濃度(mol/L)

  CO:注入樣品中溶質(zhì)的濃度(mol/L)

  GI:化學(xué)電離(MS)

  DGA:N,N-二甲基-1-萘酰胺;(也作二甲基苯胺dimethylaniline)

  EI:電子電離(MS)

  ELS:蒸發(fā)光散射擊(Evaporative light scattering)

  EtOAc:乙酸乙酯(ethyl acetate)

  FAB:快速原子轟擊(MS)

  FD:場解吸附(MS)

  h:折合板高,等于H/dP(式2.11)

  HB:羥基苯甲酸(hydrxybenzoic acid)(圖7.8,7.17與7.19)

  HFBA:七氟丁酸(hyptafluorobutyric acid)

  IPA:異丙醇(isopropanol)

  kW:以水作為流動(dòng)相的k值(式6.1)

  LCEC:液相色譜電化學(xué)檢測器

  LD:激光解吸(MS)

  LSIMS:液態(tài)二級(jí)離子質(zhì)譜

  MALDI:基質(zhì)輔助激光解吸電離

  MP:對(duì)羥苯甲酸甲酯

  [P-]m:流動(dòng)相中離子對(duì)試劑P-的濃度(mmol/L)

  PAD:脈沖電流分析檢測器

  PBP:極性鍵合相

  PD:等離子解吸(MS)

  PP:對(duì)羥苯甲酸丙酯

  PTH:乙內(nèi)酰苯硫脲

  R+,R-:分別為陰離子與陽離子離子交換色譜柱中的荷電功能基困(式7.4和7.5[如-N(CH3)3+和-SO3-]

  RF:響應(yīng)因子

  TBA+:四丁基銨離子

  tBME:見MTBE

  TMS:三甲基硅烷(trimethylsilyl;也為C1)

  TNB:1,3,5-三硝基苯(1,3,5-trinitrobenzene)

  TOF MS:時(shí)間飛行質(zhì)譜

  TSP:熱噴霧(MS)

  u:流動(dòng)相通過色譜柱的速度(cm/s);等于L/to

  V:峰底寬(mL)

  Vc:色譜柱內(nèi)峰展寬對(duì)V的貢獻(xiàn);也作小樣品量峰底寬(mL)(式2.16)

  VR:保留體積(mL)

  W:峰寬(min)(式2.12)

  Wc,WS,:分別為色譜柱,進(jìn)樣器,連續(xù)管和流通池對(duì)W的貢獻(xiàn)(min)

  Wlc,Wfc:(式2.12)

  X,X1,:無特征結(jié)構(gòu)的溶質(zhì)(圖7.8,7.17和7.19)

  X2,X3

  XB:流動(dòng)相中的B溶劑的摩爾分?jǐn)?shù)

  V:折合速度,等于udp/Dm(式2.11)

  б:高斯曲線的標(biāo)準(zhǔn)偏差;等于峰底的1/4

  ι:檢測器響應(yīng)時(shí)間常數(shù)(S)

  φ:流動(dòng)相中B溶劑的體積分?jǐn)?shù);等于0.0

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