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高中生物實驗知識點復習(3)

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  二、觀察細胞有絲分裂的實驗過程

步驟

注意問題

分析

二、裝片的制作

(解離→漂洗→染色→制片)

1.解離:

解離液:質(zhì)量分數(shù)為15%的鹽酸和體積分數(shù)為95%的酒精的混合液(1:1)

解離時間要保證,細胞才能分散開來。

解離時間也不宜過長。

目的:溶解細胞間質(zhì),使組織中的細胞相互分離開來。此時,細胞已被鹽酸殺死。

否則,根尖過于酥軟,無法取出。

2.漂洗:清水的玻璃皿中漂洗約10 min。

漂洗要充分,可換水1~2次。

目的:洗去解離液,便于染色。

3.染色:質(zhì)量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的龍膽紫溶液的玻璃皿中染色3~5min。

染色時間不宜過長,否則顯微鏡下一片紫色,無法觀察。

龍膽紫等為堿性染料,可使染色體著色。醋酸洋紅溶液也能使染色體著色

4.制片:用鑷子將這段洋蔥根尖取出來,放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子尖把洋蔥根尖弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片。然后,用拇指輕輕地壓載玻片,使細胞分散開來。

要弄碎根尖,再垂直向下均勻用力壓片,不可移動蓋玻片,

目的:使細胞分散,避免細胞重疊,便于觀察。做得成功的裝片,標本被壓成云霧狀。

三、觀察

1.低倍鏡觀察:把裝片放在低倍鏡下,慢慢移動裝片,找到分生區(qū)細胞。

2.高倍鏡觀察:移走低倍鏡,換上高倍鏡,用細準焦螺旋和反光鏡把視野調(diào)整清晰,仔細觀察,找出處于細胞分裂期中期的細胞,再找出前期、后期、末期的細胞。

一定要找到分生區(qū)。

在一個視野里,往往不容易找全有絲分裂過程中各個時期的細胞??梢月匾苿友b片,從鄰近的分生區(qū)細胞中尋找。

分生區(qū)細胞特點是:細胞呈正方形,排列緊密,有的細胞正處于分裂期。

  三、討論

  制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關(guān)鍵是什么?

  答:制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關(guān)鍵有以下幾點:

  (1)剪取洋蔥根尖材料時,應該在洋蔥根尖細胞一天之中分裂最活躍的時間;

  (2)解離時,要將根尖細胞殺死,細胞間質(zhì)被溶解,使細胞容易分離;

  (3)壓片時,用力的大小要適當,要使根尖被壓平,細胞分散開

  實驗十五 低溫誘導染色體加倍

  一、實驗原理與步驟:

  原理:用低溫處理植物分生組織細胞,能抑制紡錘體的形成,以致影響染色體被拉向兩極,細胞也不能分裂成兩個子細胞,于是,植物細胞的染色體數(shù)發(fā)生變化。

  步驟:⑴低溫誘導。⑵卡諾氏液中浸泡以固定細胞的形態(tài),再用95%的酒精沖洗2次。⑶制作裝片(解離、漂洗、染色、制片)。⑷顯微鏡觀察。

  二、課后討論題答案:

  低溫誘導和秋水仙素處理都是通過抑制分裂細胞內(nèi)紡錘體的形成,使染色體不能移向細胞兩極,而引起細胞內(nèi)染色體數(shù)目加倍??ㄖZ氏固定液(Carnoy's Fluid) 適用于一般植物組織和細胞的固定,常用于根尖,花藥壓片及子房石蠟切片等.有極快的滲透力,根尖材料固定15—20min即可,花藥則需1h左右,此液固定最多不超過24h,固定后用95%酒精沖洗至不含冰醋酸為止;如果材料不馬上用,需轉(zhuǎn)入70%酒精中保存.固定液的重要特性是能迅速穿透細胞,將其固定并維持染色體結(jié)構(gòu)的完整性,還要能夠增強染色體的嗜堿性,達到優(yōu)良染色效果。

  配方:無水酒精3份、冰醋酸1份、或無水乙醇6份,氯仿3份,冰醋酸1份。

  實驗十六 調(diào)查常見的人類遺傳病

  一、實驗原理與步驟:

  原理:顯性遺傳病具有世代相傳的特點,隱性遺傳病隔代出現(xiàn)。伴X染色體隱性遺傳病的遺傳特點是交叉遺傳,隔代出現(xiàn),患者男性多于女性。伴X染色體顯性遺傳病的遺傳特點是世代相傳,患者女性多于男性。

  步驟:①確定要調(diào)查的遺傳病,掌握其癥狀及表現(xiàn) ②設計記錄表格及調(diào)查要點③分多個小組調(diào)查,獲得足夠大的群體調(diào)查數(shù)據(jù)④匯總結(jié)果,統(tǒng)計分析

  二、注意事項:

  1、調(diào)查時,最好選取群體中發(fā)病率較高的單基因遺傳病,如紅綠色盲、白化病、高度近視(600度以上)等

  2、為保證調(diào)查的群體足夠大,小組調(diào)查的數(shù)據(jù),應在班級和年級中進行匯總

  某遺傳病的發(fā)病率=某種遺傳病的患病人數(shù)/某種遺傳病的被調(diào)查人數(shù)

  實驗十七 探究生長素類似物促進插條生根的最適濃度

  一、實驗原理:

  植物插條經(jīng)生長素類似物處理后,對植物插條的生根情況有很大的影響,而且用不同濃度、不同時間處理其影響程度亦不同。其影響存在一個最適濃度,在此濃度下植物插條的生根數(shù)量最多,生長最快。

  二、實驗注意事項

  1. 選擇插條:以1年生苗木為最好(1年或2年生枝條形成層細胞分裂能力強、發(fā)育快、易成活)

  2. 處理插條:枝條的形態(tài)學上端為平面,下端要削成斜面,這樣在扦插后可增加吸收水分的面積,促進成活。

  3. 處理方法:

  1)浸泡法:把插條的基部浸泡在配制好的溶液中,深約3cm,處理幾小時至一天。(要求的溶液濃度較低,并且最好是在遮陰和空氣濕度較高的地方進行處理)

  2)沾蘸法:把插條基部在濃度較高的藥液中蘸一下(約5s),深約1.5cm即可。

  實驗十八 探究培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的動態(tài)變化

  一、實驗原理:

  1.在含糖的液體培養(yǎng)基(培養(yǎng)液)中酵母菌繁殖很快,迅速形成一個封閉容器內(nèi)的酵母菌種群,通過細胞計數(shù)可以測定封閉容器內(nèi)的酵母菌種群隨時間而發(fā)生的數(shù)量變化。

  2.養(yǎng)分、空間、溫度和有毒排泄物等是影響種群數(shù)量持續(xù)增長的限制因素。

  二、酵母菌計數(shù)方法:抽樣檢測法或顯微計數(shù)法(用血球計數(shù)板)。

  先將蓋玻片放在計數(shù)室上,用吸管吸取培養(yǎng)液,滴于蓋玻片邊緣,讓培養(yǎng)液自行滲入。多余培養(yǎng)液用濾紙吸去。稍待片刻,待細菌細胞全部沉降到計數(shù)室底部,將計數(shù)板放在載物臺的中央,計數(shù)一個小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量,再以此為根據(jù),估算試管中的酵母菌總數(shù)。

  注意:從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數(shù)之前,要將試管輕輕震蕩幾次。

  實驗十九 土壤中動物類群豐富度的研究

  一、實驗原理:

  1.土壤不僅為植物提供水分和礦質(zhì)元素,也是一些動物的良好棲息場所。研究土壤中動物類群的豐富度,操作簡便,有助于理解群落的基本特征與結(jié)構(gòu)。

  2.許多土壤動物有較強的活動能力,而且身體微小,因此不能用樣方法或標志重捕法進行調(diào)查。在進行這類研究時,常用取樣器取樣的方法進行采集、調(diào)查,即:用一定規(guī)格的捕捉器(如采集缺罐、吸蟲器等進行取樣)。

  二、豐富度的統(tǒng)計方法:記名計算法和目測估計法。

  記名計算法是指在一定面積的樣地中,直接數(shù)出各種群的個體數(shù)目,這一般用于個體較大,種群數(shù)量有限的群落。

  目測估計法是按預先確定的多度等級來估計單位面積上個體數(shù)量的多少。等級的劃分和表示方法有:“非常多、多、較多、較少、少、很少”等等。
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