高中生物實(shí)驗(yàn)知識(shí)點(diǎn)復(fù)習(xí)(3)
二、觀察細(xì)胞有絲分裂的實(shí)驗(yàn)過程
步驟 | 注意問題 | 分析 |
二、裝片的制作 （解離→漂洗→染色→制片） 1．解離： 解離液：質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸和體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精的混合液（1：1） | 解離時(shí)間要保證，細(xì)胞才能分散開來。 解離時(shí)間也不宜過長(zhǎng)。 | 目的：溶解細(xì)胞間質(zhì)，使組織中的細(xì)胞相互分離開來。此時(shí)，細(xì)胞已被鹽酸殺死。 否則，根尖過于酥軟，無法取出。 |
2．漂洗：清水的玻璃皿中漂洗約10 min。 | 漂洗要充分，可換水1~2次。 | 目的：洗去解離液，便于染色。 |
3．染色：質(zhì)量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的龍膽紫溶液的玻璃皿中染色3~5min。 | 染色時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則顯微鏡下一片紫色，無法觀察。 | 龍膽紫等為堿性染料，可使染色體著色。醋酸洋紅溶液也能使染色體著色 |
4．制片：用鑷子將這段洋蔥根尖取出來，放在載玻片上，加一滴清水，并用鑷子尖把洋蔥根尖弄碎，蓋上蓋玻片，在蓋玻片上再加一片載玻片。然后，用拇指輕輕地壓載玻片，使細(xì)胞分散開來。 | 要弄碎根尖，再垂直向下均勻用力壓片，不可移動(dòng)蓋玻片， | 目的：使細(xì)胞分散，避免細(xì)胞重疊，便于觀察。做得成功的裝片，標(biāo)本被壓成云霧狀。 |
三、觀察 1．低倍鏡觀察：把裝片放在低倍鏡下，慢慢移動(dòng)裝片，找到分生區(qū)細(xì)胞。 2．高倍鏡觀察：移走低倍鏡，換上高倍鏡，用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋和反光鏡把視野調(diào)整清晰，仔細(xì)觀察，找出處于細(xì)胞分裂期中期的細(xì)胞，再找出前期、后期、末期的細(xì)胞。 | 一定要找到分生區(qū)。 在一個(gè)視野里，往往不容易找全有絲分裂過程中各個(gè)時(shí)期的細(xì)胞?？梢月匾苿?dòng)裝片，從鄰近的分生區(qū)細(xì)胞中尋找。 | 分生區(qū)細(xì)胞特點(diǎn)是：細(xì)胞呈正方形，排列緊密，有的細(xì)胞正處于分裂期。 |
三、討論
制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關(guān)鍵是什么?
答：制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關(guān)鍵有以下幾點(diǎn)：
(1)剪取洋蔥根尖材料時(shí)，應(yīng)該在洋蔥根尖細(xì)胞一天之中分裂最活躍的時(shí)間;
(2)解離時(shí)，要將根尖細(xì)胞殺死，細(xì)胞間質(zhì)被溶解，使細(xì)胞容易分離;
(3)壓片時(shí)，用力的大小要適當(dāng)，要使根尖被壓平，細(xì)胞分散開
實(shí)驗(yàn)十五 低溫誘導(dǎo)染色體加倍
一、實(shí)驗(yàn)原理與步驟：
原理：用低溫處理植物分生組織細(xì)胞，能抑制紡錘體的形成，以致影響染色體被拉向兩極，細(xì)胞也不能分裂成兩個(gè)子細(xì)胞，于是，植物細(xì)胞的染色體數(shù)發(fā)生變化。
步驟：⑴低溫誘導(dǎo)。⑵卡諾氏液中浸泡以固定細(xì)胞的形態(tài)，再用95%的酒精沖洗2次。⑶制作裝片(解離、漂洗、染色、制片)。⑷顯微鏡觀察。
二、課后討論題答案：
低溫誘導(dǎo)和秋水仙素處理都是通過抑制分裂細(xì)胞內(nèi)紡錘體的形成，使染色體不能移向細(xì)胞兩極，而引起細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目加倍?？ㄖZ氏固定液(Carnoy's Fluid) 適用于一般植物組織和細(xì)胞的固定,常用于根尖,花藥壓片及子房石蠟切片等.有極快的滲透力,根尖材料固定15—20min即可,花藥則需1h左右,此液固定最多不超過24h,固定后用95%酒精沖洗至不含冰醋酸為止;如果材料不馬上用,需轉(zhuǎn)入70%酒精中保存.固定液的重要特性是能迅速穿透細(xì)胞，將其固定并維持染色體結(jié)構(gòu)的完整性，還要能夠增強(qiáng)染色體的嗜堿性，達(dá)到優(yōu)良染色效果。
配方：無水酒精3份、冰醋酸1份、或無水乙醇6份，氯仿3份，冰醋酸1份。
實(shí)驗(yàn)十六 調(diào)查常見的人類遺傳病
一、實(shí)驗(yàn)原理與步驟：
原理：顯性遺傳病具有世代相傳的特點(diǎn)，隱性遺傳病隔代出現(xiàn)。伴X染色體隱性遺傳病的遺傳特點(diǎn)是交叉遺傳，隔代出現(xiàn)，患者男性多于女性。伴X染色體顯性遺傳病的遺傳特點(diǎn)是世代相傳，患者女性多于男性。
步驟：①確定要調(diào)查的遺傳病，掌握其癥狀及表現(xiàn) ②設(shè)計(jì)記錄表格及調(diào)查要點(diǎn)③分多個(gè)小組調(diào)查，獲得足夠大的群體調(diào)查數(shù)據(jù)④匯總結(jié)果，統(tǒng)計(jì)分析
二、注意事項(xiàng)：
1、調(diào)查時(shí)，最好選取群體中發(fā)病率較高的單基因遺傳病，如紅綠色盲、白化病、高度近視(600度以上)等
2、為保證調(diào)查的群體足夠大，小組調(diào)查的數(shù)據(jù)，應(yīng)在班級(jí)和年級(jí)中進(jìn)行匯總
某遺傳病的發(fā)病率=某種遺傳病的患病人數(shù)/某種遺傳病的被調(diào)查人數(shù)
實(shí)驗(yàn)十七 探究生長(zhǎng)素類似物促進(jìn)插條生根的最適濃度
一、實(shí)驗(yàn)原理：
植物插條經(jīng)生長(zhǎng)素類似物處理后，對(duì)植物插條的生根情況有很大的影響，而且用不同濃度、不同時(shí)間處理其影響程度亦不同。其影響存在一個(gè)最適濃度，在此濃度下植物插條的生根數(shù)量最多，生長(zhǎng)最快。
二、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
1. 選擇插條：以1年生苗木為最好(1年或2年生枝條形成層細(xì)胞分裂能力強(qiáng)、發(fā)育快、易成活)
2. 處理插條：枝條的形態(tài)學(xué)上端為平面，下端要削成斜面，這樣在扦插后可增加吸收水分的面積，促進(jìn)成活。
3. 處理方法：
1)浸泡法：把插條的基部浸泡在配制好的溶液中，深約3cm，處理幾小時(shí)至一天。(要求的溶液濃度較低，并且最好是在遮陰和空氣濕度較高的地方進(jìn)行處理)
2)沾蘸法：把插條基部在濃度較高的藥液中蘸一下(約5s)，深約1.5cm即可。
實(shí)驗(yàn)十八 探究培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化
一、實(shí)驗(yàn)原理：
1.在含糖的液體培養(yǎng)基(培養(yǎng)液)中酵母菌繁殖很快，迅速形成一個(gè)封閉容器內(nèi)的酵母菌種群，通過細(xì)胞計(jì)數(shù)可以測(cè)定封閉容器內(nèi)的酵母菌種群隨時(shí)間而發(fā)生的數(shù)量變化。
2.養(yǎng)分、空間、溫度和有毒排泄物等是影響種群數(shù)量持續(xù)增長(zhǎng)的限制因素。
二、酵母菌計(jì)數(shù)方法：抽樣檢測(cè)法或顯微計(jì)數(shù)法(用血球計(jì)數(shù)板)。
先將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取培養(yǎng)液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入。多余培養(yǎng)液用濾紙吸去。稍待片刻，待細(xì)菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)室底部，將計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)的中央，計(jì)數(shù)一個(gè)小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量，再以此為根據(jù)，估算試管中的酵母菌總數(shù)。
注意：從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，要將試管輕輕震蕩幾次。
實(shí)驗(yàn)十九 土壤中動(dòng)物類群豐富度的研究
一、實(shí)驗(yàn)原理：
1.土壤不僅為植物提供水分和礦質(zhì)元素，也是一些動(dòng)物的良好棲息場(chǎng)所。研究土壤中動(dòng)物類群的豐富度，操作簡(jiǎn)便，有助于理解群落的基本特征與結(jié)構(gòu)。
2.許多土壤動(dòng)物有較強(qiáng)的活動(dòng)能力，而且身體微小，因此不能用樣方法或標(biāo)志重捕法進(jìn)行調(diào)查。在進(jìn)行這類研究時(shí)，常用取樣器取樣的方法進(jìn)行采集、調(diào)查，即：用一定規(guī)格的捕捉器(如采集缺罐、吸蟲器等進(jìn)行取樣)。
二、豐富度的統(tǒng)計(jì)方法：記名計(jì)算法和目測(cè)估計(jì)法。
記名計(jì)算法是指在一定面積的樣地中，直接數(shù)出各種群的個(gè)體數(shù)目，這一般用于個(gè)體較大，種群數(shù)量有限的群落。
目測(cè)估計(jì)法是按預(yù)先確定的多度等級(jí)來估計(jì)單位面積上個(gè)體數(shù)量的多少。等級(jí)的劃分和表示方法有：“非常多、多、較多、較少、少、很少”等等。
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